פיתוח תהליכים במורד הזרם

CDMO מיקרוביאלי

המשמעות של פיתוח תהליך מטה (DSP).

מרק התסיסה כולו מכיל חלבון מטרה או פלסמיד, כמו גם זיהומים הקשורים למוצר ולתהליך, למשל, אגרגטים, מצעי תאים מיקרוביאליים, חלבוני תא מארח (HCP), DNA של תא מארח (HCD), אנדוטוקסין ואנטיביוטיקה.

לכן, חיוני לתכנן DSP יעיל, תהליך טיהור, כדי להסיר זיהומים מסוימים ולייצר חומר תרופה מטוהר ואיכותי ביותר. בנוסף, האופטימיזציה של תהליך הטיהור יכולה לעזור להגדיל את שחזור המוצר, להפחית עלויות ולשפר את מדרגיות התהליך ושחזור.

מילות מפתח: פיתוח תהליכים, אופטימיזציה ואימות, תהליך טיהור, כרומטוגרפיה, סילוק זיהומים, הסרת HCP, סילוק HCD, הסרת אנדוטוקסינים, דנטורציה וקיפול מחדש של חלבון, הרכבת VLP, צימוד

יישום: תעשיית ביו-פרמצבטיקה, רפואת אדם, רפואת בעלי חיים, חיסון, ביולוגיות מולקולות גדולות רקומביננטיות, ביולוגיות רקומביננטיות, מגיב ביולוגי

פתרונות DSP של Yaohai Bio-Pharma

יש לנו ניסיון רב בבידוד חלבוני מטרה או פלסמידים ממטריצות מורכבות על ידי פיתוח ואופטימיזציה של תהליך טיהור במורד הזרם. ישנם סוגים שונים של פעולות יחידה המתאימות לטיהור של תרופות ביולוגיות, כולל צנטריפוגה, סינון, הומוגניזציה, תמוגה אלקליין, אולטרה סינון, משקעים, דנטורציה וקיפול מחדש של חלבון, כרומטוגרפיה וכו'.

שירותי פיתוח הטיהור הזמינים שלנו כוללים:

פיתוח כל תהליך הטיהור מאיסוף התא או הסופרנטנט ועד החומר הפעיל הסופי.
אופטימיזציה של תהליך הטיהור בהתבסס על זיהומים הקשורים למוצר ולתהליך כדי להגביר את איכות ובטיחות המוצר, למשל, HCP, HCD, אנדוטוקסין.
הגדרה ואופטימיזציה של פרמטרים מרכזיים בפעולת יחידה אחת או כמה, לרבות תמוגה של תאים, סינון זרימה משיקית, הקרנת שרף, כרומטוגרפיה, דנטורציה וקיפול מחדש של חלבון וכו'.
אופטימיזציה של התהליך מבחינת איכות, תשואה, התאוששות, עלות ומדרגיות.
אימות תהליך הטיהור במורד הזרם.
הערכת טווח פרמטרים מבוססת סיכונים ועיצוב ניסויים (DoE) במודל תהליכים.

פרטי השירות

פלטפורמות סטנדרטיות לטיהור חלבון או פלסמיד מבוססות על שלבי טיהור גולמי מרובים ופחות מ-4 שלבי כרומטוגרפיה, כולל לכידה, טיהור ביניים וליטוש.

פרטי השירות	תפעול יחידה	פרמטרים
טיהור גולמי	צנטריפוגה	מהירות סיבוב, זמן
	הומוגניזציה בלחץ גבוה	סך תוכן מוצק, לחץ, מחזורים
	ליזה אלקלית מתמשכת	היחס בין תאים מורחקים לתמיסת ליסיס, זמן ליסיס
	סינון זרימה טנגנטיאלית	חומר ממברנה וגודל נקבוביות, קצב זרימת הזנה חוצה ממברנה (TMP), יחס נפח סינון לשטח ממברנה
	משקע	סוג וריכוז המשקעים, תוסף, pH, טמפרטורה, זמן
דנטורציה וקיפול מחדש	מסיס חלבון גוף הכללה	ריכוז דנטורנטים (לדוגמה, אוריאה, גואנידין HCl, חומר ניקוי יוני חזק), חומרי ניקוי (למשל, סודיום דודציל סולפט, SDS), חומרים מפחיתים (למשל, Dithiothreitol, DTT), חומרי קליטה (חומצה אתילנדיאמין-טטרה-אצטית, EDTA), טמפרטורה, זמן
דנטורציה וקיפול מחדש	קיפול חלבון מחדש	שיטות קיפול מחדש (דילול, דיאליזה או קיפול מחדש של SEC), ריכוזי חלבון, חוצצים, pH, טמפרטורה, זמן, חומרים מחמצנים ומפחיתים (למשל, גלוטתיון, GSH/גלוטתיון מחומצן, GSSH, DTT/GSSH, ציסטאין/ציסטין), תוספים למולקולות קטנות. (L-arginine, אוריאה, גואנידין/HCl וחומרי ניקוי)
לכידה, טיהור ביניים וליטוש	AC (כרומטוגרפיית זיקה)	מספר סוגים של שרף/עמוד כרומטוגרפיה (למשל, AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), אורך וקוטר עמודה, הרכב מאגר, נפח הזרקה, הרכב שלב נייד (ספיחה ופירוק), pH, קצב זרימה, כריכה, תנאי כביסה וניקוי.
	IEX (כרומטוגרפיה של אניונים או קטונים)
	HIC (כרומטוגרפיה של אינטראקציה הידרופוביה)
	כרומטוגרפיה של הסרת מלח ו/או אי הכללת גודל (SEC)
	RPC (כרומטוגרפיה הפוכה של שלב)
	MMC, כרומטוגרפיה מעורבת

מקרה לדוגמה

במקרה 1

אנו הוזמנו לפתח ולייעל את תהליך הטיהור במורד הזרם כדי להגדיל את טוהר החלבון מ-85% ל-90% תוך הפחתת שלבי הכרומטוגרפיה.

Yaohai סיפק תהליך טיהור חזק וניתן להרחבה עם 3 שלבים של כרומטוגרפיה עבור חלבון המטרה, אלרגיה חיידקית. והטוהר הסופי הגיע ל-95%.

במקרה 2

יאוהאי מונה על ידי הלקוח שלנו לייעל את תהליך הסרת האנדוטוקסינים של החיסון דמוי חלקיקי וירוס (VLP).

הצוות שלנו ביצע אופטימיזציה של פרמטרי כרומטוגרפיה והכין חומר תרופתי עם טוהר של 98% ושאריות אנדוטוקסין של 12.8EU/mg.

החוויות שלנו

היינו מעורבים בפיתוח וייצור של מולקולות גדולות שונות, כולל חיסונים רקומביננטיים של תת-יחידות, VLPs, הורמונים (אינסולין, GLP-1, הורמון גדילה), ציטוקינים (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21 ), גורמי גדילה (EGF, FGF, NGF), ננוגודים/נוגדנים בדומיין יחיד (sdAbs), אנזימים וכו'.

ציוד מחנאות

אנו משתמשים במערכות AKTA Pure, AKTA Avant ו-Preparative HPLC המובילות בתעשייה לביצוע של שיטות כרומטוגרפיה שונות, כולל זיקה, חילופי יונים, אינטראקציה הידרופוביה, כרומטוגרפיה הפוכה של שלב והרחקת גודל.

כל הקטגוריות

פיתוח תהליכים במורד הזרם

CDMO מיקרוביאלי