פירוק חבורות גלוטמין ואספראגין הוא תהליך מודיפיקציה שכיחה שמשפיע על תכונותיהם של ביופרמצבים חלבוניים. פירוק יכול להתרחש גם בחבורות גלוטמין, אך בדרך כלל בהרבה קצב נמוך יותר. קצבי הפירוק מושפעים מטמפרטורה, pH, מבנה חלבון מקומי וחומצות אמינו סמוכות.
Yaohai BioPharma מציעה שירות בדיקת פירוק חומצות אמינו, המאפשר לך לגלות פירוק חומצות אמינו באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטר מסה (LC-MS).
נמצאנו מעורבים באפיון מבני חלבונים של מולקולות גדולות רבות, כולל חיסונים תת-יחידה רקורסנטיים, Nanobodies/VHHs/ חלבונים חד-תחום (sdAbs), שברים של חלבונים, הורמונים/פטידים, ציטוקינים, גורמי גידול (CF), אנזימים, קולג'נים, וכו'.
דרישות רגולטוריות לפירוק חומצות אמינו
לפי הוראות ICH Q6B, צורות דיאמידים עשויות להיות מזוהות ומאופיינות על ידי שיטות אנליטיות כרומטוגרפיות, אלקטרופורטיות ואחרות רלוונטיות.
שיטות אנליטיות
| ניתוח |
שיטות |
| דיאמידציה |
כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטר מסה (LC-MS) |
הפרוצדורות
לדוגמה, דיאמידציה של אספרטית
1. חתיכת אנזימטית
2. LC-MS תחת תנאי כרומטוגרפיה נוזלית ביצועית גבוהה (HPLC)
3. ניתוח נתונים
הדיאמידציה של אספרגינין מתרחשת דרך אינטרמediator סוקסינימיד (Suc), שהוא רגיש לרצמייזציה והידרוליזה, מה שמוביל לארבעה איזומרים של אספרטית, כולל L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp ו-D-IsoAsp.
בתיאוריה, הדיאמידציה של Gln יכולה להפיק ארבעה איזומרים מתאימים של Glu באמצעות תהליך דומה לדיאמידציה של Asn.
המאס-ספקטרומטריה בעלת התאמה גבוהה מזדהה בקלות על ההבדל של מסה של 1-Da בין פפטידים המכילים Asn/Gln ובין המקבילים שלהם שחלפו דehmidation, Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
