פרופיל N-glycans חיוני לייצור ביו-פרמצבטיקה. Yaohai Bio-Pharma מספקת שירות פרופיל N-glycan באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS) של גליקנים משוחררים ומסומנים. השלבים הכלליים להכנת דגימת N-glycans כוללים עיכול של הגליקופרוטאין (GP), דה-גליקוזילציה, טיהור, תיוג/נגזרת וחילוץ מוצק (SPE).
היינו מעורבים באפיון מבני החלבון של מולקולות גדולות שונות, כולל חיסונים רקומביננטיים של תת-יחידות, ננוגודים/VHHs/נוגדנים דומיינים בודדים (sdAbs), שברי נוגדנים, הורמונים/פפטידים, ציטוקינים, גורמי גדילה (GF), אנזימים, קולגנים, וכו '
דרישות רגולטוריות עבור N-Glycan Profiling
על פי הנחיית ICH Q6B, "עבור גליקופרוטאינים, תכולת הפחמימות (סוכרים ניטרליים, סוכרי אמינו וחומצות סיאליות) נקבעת. בנוסף, המבנה של שרשראות הפחמימות, דפוס האוליגוסכרידים (פרופיל אנטני) ואתרי הגליקוזילציה של שרשרת הפוליפפטיד מנותחים במידה האפשרית.
שיטה אנליטית
| אָנָלִיזָה |
שיטות |
| פרופיל N-glycan |
ניתוח כרומטוגרפיה נוזלי-ספקטרומטריית מסה (LC-MS) של גליקנים משוחררים ומסומנים |
נהלים
1. שחרור גליקן אנזימטי עם פפטיד N-Glycosidase F (PNGase F)
2. נגזרת של גליקנים משוחררים על ידי 2-aminobenzamide (2-AB)
3. טיהור של ה-N-glycans שנקטפו על עמודת TSK Amide - 80 אם קיימות כמויות גדולות של חומרי ניקוי, מלחים לא נדיפים או חומרים עם קבוצות אמינו חופשיות.
4. תיוג באמצעות פלורסנט 2-aminobenzamide (2-AB)
5. ניתוח LC-MS של N-glycans מסומנים
6. ניתוח נתונים
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
לא
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
