הפרופיילינג של N-גליקנים הוא חיוני לייצור תרופות ביופרמaceutics. Yaohai Bio-Pharma מספקת שירות פרופיילינג של N-גליקנים באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית - ספקטרומטריה מסית (LC-MS) של גליקנים שוחררים ומסומנים. השלבים הכלליים להכנה של דגימה של N-גליקנים כוללים את חתיכת הגליקופרוטאין (GP), הסרה של הגלוקוז, טיהור, סימון/derivatization, והפרדת שלב מוצק (SPE).
נמצאנו מעורבים באנליזה המבנית של חלבונים של מולקולות גדולות שונות, כולל חיסונים רקורסנטיים תת-יחידתיים, ננובדיות/VHHs/antibodies חד-תחום (sdAbs), שברים של חלבונים, הורמונים/פפטידים, ציטוקינים, גורמי גידול (GF), אנזימים, קולג'נים, וכו'.
דרישות רגולטוריות לפרופיילינג של N-גליקן
לפי הוראות ICH Q6B, "עבור גליקופרוטאינים, נקבע התכולה של קרבונדרים (סוכרים ניטרליים, סוכרים אמינו וחומצות סיאליות). בנוסף, מוחקרת המבנה של שרשרת הקרבונדרים, תבנית האוליגוסכרידים (פרופילrofile antennary), והאתרים של גיליקוזילציה של שרשרת הפוליפפטיד עד כמה שאפשר.
שיטה אנליטית
| ניתוח |
שיטות |
| הערכה של N-גליקן |
ניתוח LC-MS של גיליקנים שוחררו וסומנו |
הפרוצדורות
1. שחרור גיליקן אנזימטי עם פפטיד N-גליקוזידאז F (PNGase F)
2. דריבטיזציה של גיליקנים שוחררו על ידי 2-אמינובנזאמיד (2-AB)
3. טיהור הגיליקנים N שהושקעו על עמודה TSK Amide - 80 אם יש כמויות גדולות של דטרגנטים, מלחים לא-נפוצים או חומרים עם קבוצות אמינו חופשיות
4. סימון באמצעות 2-אמינובנזאמיד (2-AB) פלורסנטי
5. ניתוח LC-MS של גיליקנים N מסומנים
6. מה? ניתוח נתונים
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
