חלבונים שטוחים מנסים לעתים קרובות את חמצון שרשרת הצד של חומצות אמינו חשופות, כמו טריפטופן (Trp) ומטיאונין (Met), מה שמשנה את התכונות הפיזיקו-כימיות של החלבונים. שינויים אלו עלולים להתרחש בהמשך לשבירת הפונקציות הביולוגיות של החלבונים המושפעים, כמו אובדן קישור, ירידה בפעילות אנזימטית, והסרה מהירה שלא צפוייה. חלבונים הם מטרות חשובות לתגובות חמצון מכיוון שהם מגיבים במהירות עם חומצי חמצון והם נפוצים בתאים, רקמות חוץ תאיות ובנוזלים CORPORAL.
לכן, מעקב אחר חמצון חלבונים הוא קריטי לפיתוח ביופרמצבתי מוצלח.
Yaohai Bio-Pharma מציעה שירות ניתוח חמצון חומצות אמינו, שמאפשר לך לקבוע את חמצון חומצות האמינו באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית-מסה (LC-MS).
נשאנו חלק בחקירת המבנה של חלבונים של מולקולות גדולות שונות, כולל חיסונים תת-יחידה רקורסנטיים, ננובדיות / VHHs / אנטיבדיז חד-תחום (sdAbs), שברים של אנטיבדיז, הורמונים/פפטידים, ציטוקינים, גורמי צמיחה (GF), אנזימים, קולג'נים, וכו'.
דרישות תקנות לאוקסידציה של חומצות אמינו
לפי הנחיות ICH Q6B, צורות מאוקסידות עשויות להיקشف ולתואם על ידי שיטות אנליטיות כרומטוגרפיות, אלקטרופורטיות ואחרות רלוונטיות (למשל, כרומטוגרפיה נוזלית מופעלת בלחץ גבוה (HPLC), אלקטרופורזה דרך קפילריים, ספקטרוסקופיה מסה, דיכרוזים מעגלי).
שיטות אנליטיות
| ניתוח |
שיטות |
| חמצון של חומצות אמינו |
LC-MS, כרומטוגרפיה נוזלית מופעלת בלחץ גבוה בเฟזה הפוכה (RP-HPLC) או כרומטוגרפיה נוזלית מופעלת בלחץ גבוה עם אינטראקציה הידרופובית (HIC-HPLC) וספקטרוסקופיה מסה |
תהליכים אנליטיים
1. הכנת מדגם
2. LC-MS
3. ניתוח נתונים
אmino חומצות טריפטופן (Trp) חשופות במיוחד לאוקסידציה בגלל התגובה הגבוהה של הרינגה האโรמטית עם מינים אקטיביים של חמצן. אוקסידציית Trp דורשת חשיפה מסוימת של שאריות Trp שרגילים להיות קבורים בתוך המבנה התלת-מימדי של החלבון.
עם זאת, כששאריות Trp מאוקסידות, הן יכולות להפוך לסדרה של תוצרים בעלי תכונות שונות מאוד מהTrp המקורי. הדרך השכיחה ביותר לאוקסידציית Trp כוללת את צורת N-formylkynurenine (הפרש מסה: +32).
אmino חומצה אחרת שאינה נדירה באוקסידציה היא מתיאON. האטום הסולפר בשארית Met יכול לקבל או אטום חמצן אחד או שניים, מה שגורם לצמיחת sulfoxide (הפרש מסה: +16) או sulfone (הפרש מסה: +32), בהתאמה. התיקון הזה הוא יחסית שכיח בשל החשיפה הגבוהה בדרך כלל של Met על פני השטח.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
