חלבונים רקומביננטיים רואים לעתים קרובות את החמצון של שרשראות צד של חומצות אמינו חשופות, כגון טריפטופן (Trp) ומתיונין (Met), ומשנים את התכונות הפיזיקליות-כימיות של חלבונים. שינויים אלה עשויים בתורם לתרום לשינוי התפקודים הביולוגיים של החלבונים המושפעים, כגון אובדן קשירה, הפחתת פעילות אנזימטית, פינוי מהיר באופן בלתי צפוי. חלבונים הם מטרות חשובות לתגובות חמצון מכיוון שהם מגיבים במהירות עם חומרים מחמצנים ונמצאים בשפע בתאים, רקמות חוץ-תאיות ונוזלי גוף.
לכן, ניטור חמצון חלבון הוא קריטי לפיתוח ביו-פרמצבטי מוצלח.
Yaohai Bio-Pharma מציעה שירות ניתוח חמצון חומצות אמינו, המאפשר לך לקבוע את חמצון חומצות האמינו על ידי Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS).
היינו מעורבים באפיון מבני החלבון של מולקולות גדולות שונות, כולל חיסונים רקומביננטיים של תת-יחידות, ננוגודים/VHHs/נוגדנים דומיינים בודדים (sdAbs), שברי נוגדנים, הורמונים/פפטידים, ציטוקינים, גורמי גדילה (GF), אנזימים, קולגנים, וכו '
דרישות רגולטוריות לחמצון חומצות אמינו
על פי הנחיות ICH Q6B, צורות מחומצנות עשויות להתגלות ולאפיין על ידי שיטות כרומטוגרפיות, אלקטרופורטיות ו/או שיטות אנליטיות רלוונטיות אחרות (למשל, High Performance Liquid Chromatography (HPLC), אלקטרופורזה נימית, ספקטרוסקופיה מסה, דיכרואיזם מעגלי).
שיטות אנליטיות
| אָנָלִיזָה |
שיטות |
| חמצון חומצת אמינו |
LC-MS, Reversed Phase High Performance Chromatography (RP-HPLC) או הידרופובי אינטראקציה כרומטוגרפיה High Performance Liquid Chromatography (HIC-HPLC) וספקטרומטריית מסה |
נהלים אנליטיים
1. הכנה לדוגמא
2. LC-MS
3. ניתוח נתונים
שאריות טריפטופן (Trp) נוטות במיוחד להתחמצנות בגלל התגובתיות הגבוהה של האינדול הארומטי עם מיני חמצן תגובתיים. חמצון Trp דורש חשיפה מסוימת של שאריות Trp שבדרך כלל קבורות במבנה התלת מימדי של החלבון.
עם זאת, כאשר שרידי Trp מתחמצנים, הם יכולים להפוך למגוון מוצרים בעלי תכונות שונות מאוד מה-Trp המקורי. המסלול הנפוץ ביותר לחמצון Trp כולל יצירת N-formylkinurenine (הפרש מסה: +32).
חומצת אמינו נוספת שחומצנת בדרך כלל היא מתיונין. אטום הגופרית בשארית Met יכול לקבל אטום חמצן אחד או שניים המובילים ליצירת סולפטוקסיד (הפרש מסה: +16) או סולפון (הפרש מסה: +32), בהתאמה. שינוי זה נפוץ יחסית בגלל החשיפה הגבוהה של פני השטח של Met.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
לא
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
