Nøgleenzymer til lang-RNA-produktion
mRNA, som en type lang kodende RNA, fungerede sikkert og effektivt i en bredere vifte af mennesker under COVID-19. Andre langkodende RNA'er, som selvforstærkende RNA (saRNA) og cirkulært mRNA (circRNA) viste også effektivitet i prækliniske og kliniske undersøgelser.
Storskalaproduktion af lang-kodende RNA er afhængig af in vitro-transkription (IVT) ved adskillige enzymatiske reaktioner. Trinene i RNA-produktion omfatter skabelon-DNA-forberedelse, IVT-RNA-syntese, cirkulation, DNA-fjernelse, RNA-modifikation (capping og tailing) og RNA-oprensning.
Der er flere nøgleenzymer, der anvendes i lang kodende RNA-produktion (f.eks. mRNA, saRNA og circRNA), herunder restriktionsendonukleaser, T7 RNA-polymerase (T7 RNAP), RNase-hæmmer, uorganisk pyrophosphatase, DNase I, vaccinia-afdækningsenzym og RNase R.
|
Proces
|
Enzym
|
Funktion
|
|
Skabelon DNA forberedelse
|
Restriktionsendonukleaser
|
Linearisering af plasmid DNA (pDNA) for at undgå at generere længere transkript.
|
|
IVT RNA syntese
|
T7 RNA polymerase (T7 RNAP)
|
Bind til T7-promotoren og generer specifikt RNA-transkript; Spille en nøglerolle under IVT-reaktion.
|
|
RNase-hæmmer, rekombinant
|
Hæmmer RNase-aktivitet under IVT-reaktion.
|
|
Pyrophosphatase, uorganisk (iPPase)
|
Forebyg pyrophosphat under IVT-reaktion.
|
|
DNA fjernelse
|
DNase I
|
Fjern DNA-skabelonen.
|
|
RNA modifikation
|
Vaccinia capping enzym
|
Tilføj Cap1-strukturer til 5′-enderne af IVT-mRNA.
|
|
2'-O-Methyltransferas
|
| circRNA berigelse |
RNase R |
Fordøj lineært RNA og berig cirkulært RNA. |
Yaohai Bio-Pharma tilbyder One-Stop CDMO-løsning til enzymer
DA
EN
AR
HR
CS
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
INGEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
