Alle kategorier
Proteinforberedelse uden tag

Proteinforberedelse uden tag

Forside >  Mikrobiel CDMO  >  Forskning & Opdagelse  >  Proteinforberedelse uden tag

Proteinforberedelse uden tag

Proteintags, som bruges som fusionspartnere i rekombinant DNA-teknologi, gør det muligt at foretage effektiv en-trinns affinitetsrensningsprocedurer for forskellige proteiner/peptider med forskellige egenskaber. Trods denne vigtige fordel kan tags som fremmede aminosyrer ændre proteinstrukturen og biologiske funktioner. Derfor er tag-frie (tag-free) proteiner eller peptider mere foretrukne for at sikre sikkerhed og effektivitet, især inden for biopharmaceutisk område. Et rekombinant protein med en fusionstag har begrænsede muligheder for at få tilladelse fra medicinsk/farmaceutisk myndighed.

På baggrund af platformen for mikrobiologisk R&D tilbyder Yaohai Bio-Pharma tilpassede tjenester inden for tag-fri proteinpræparation, dedikeret til at opfylde unikke mål for forskning, udvikling og produktion til klinisk brug.

Nøgleord: produktion af protein uden tag, rensningsmetoder for protein uden tag, forberedelse af protein baseret på tag-fri teknologi, udtryk og renning af protein uden tag, høj grad af målprotein uden tag

Anvendelse: forskning inden for menneskelig medicin, udvikling af dyremedicin, udvikling af rekombinante vacciner, produktion af rekombinante store molekylære biologiske produkter

Vores Mikrobiologiske R&D Platform

Vi har erfaring inden for mikrobiel stamcellering, fermentering og produktrensningsmetoder.

Bakterier: Escherichia coli (E. coli)

Gær: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Tilpasset valgmuligheder
Modalitet Rekombinant Protein
Udgangsmaterialer Gensekvenser, rekombinant plasmid eller konstruerede stammer
Leverancer Rengør: >80%, >85%, >90% Mængde: 0,2~10 g (skal afgøres af projektet)
Ekspressionsystem og formation

E. coli periplasmisk sekretion, løselig og inklusionslegeme-ekspression;

Gær intracellulær eller sekretions-ekspression

Analysemetoder Ultraviolett (UV), bicinchonin-assay (BCA), Bradford eller Lowry til mængdebestemmelse
Sodium dodecyl-sulfat polyacrylamide gel elektrofose (SDS-PAGE) til renhedstest
Valgfrit: Western blot (WB), enzym-koplet immunosorbent test (ELISA), højtydende væskekromatografi (HPLC)
Resterende forurenninger Endotoxin (valgfrit)
Servicedetaljer

Tjenester

Servicedetaljer

Minimalt tidsforløb (arbejdsdage)

Genetisk syntese

Codonoptimering til specifik udtryksvært

7~10 dage

Genetisk syntese

Plasmid/vektorkonstruktion

Kloning ind i plasmid/vektor

2 dage

Plasmidtransformation

Polymerasekædereaktion (PCR) verifikation, restriktionsenzymfordeling, gensekvensering

3 dage

Proteinudtryk i E. coli

Plasmidtransformation,

2 dage

Dyrkning i rysteflasken

3 dage

7L-skala fermentering, optimering

4 dage/batch

Tag-fri proteinren purification, optimering

5~10 dage/batch

Test med sodium dodecyl-sulfat polyacrylamide gel elektroforese (SDS-PAGE)

Proteinudtryk i gær

Forberedelse af gærkompetente celler

4 dage

Plasmidlinearisering og elektrotransformation

7L-skala fermentering, optimering

5 dage

Tag-fri proteinren purification, optimering

7 dage/præ

Tag-fri proteinrening

5~10 dage/batch

Kvalitetskontrol ved SDS-PAGE

Yderligere tjenester (Valgfrie)
Få et gratis tilbud

Get in touch