Yaohai Bio-Pharma tilbyder N-terminalsekvenserings- og dataanalyse-tjenester baseret på Væskekromatografi-Massespektrometri (LC-MS) eller Edman-degradationsmetoden, hvilket giver dig mulighed for at bestemme aminosyrerne ved de respektive terminer af det interesserende protein. N-terminalmodifikation kan også analyseres ved LC-MS.
Vi har været inddraget i karakteriseringen af proteinstrukturen for forskellige store molekyler, herunder Rekombinante Subenhedsvaciner, Nanokroppe/VHH'er/Enkelt-domæne-antistoffer (sdAbs), Antibiotikfragmenter, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Vækstfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener osv.
Reguleringskrav for N-terminalsekvensering
I overensstemmelse med ICH Q6B-vejledninger er det nødvendigt at bekræfte sekvensen af dit protein og undersøge terminerne efter eventuelle variationer, der muligvis findes.
Metoder til N-terminalsekvensering
Analyse |
Metode |
N-terminal følge |
Edman-degradation, Væskekromatografi-Massespektrometri (LC-MS) |
Procedurer
LC-MS
1. Fluorescent markering af protein N-terminus
2. Flere fordoblinger
3. LC-MS/Massespekrometri (MS) analyse
Edman degradations
1. Sodium Dodecyl Sulfat (SDS) gel elektroforesis af dit målprotein
2. Overfør gel til Polyvinylidendifluorid (PVDF) membraner og farve
3. Identificér og skær det ønskede proteinbånd ud
4. Edman sekvensering af N-terminus
5. Dataanalyse