Yaohai Bio-Pharma tilbyder N-terminal sekvenstest og dataanalysetjenester baseret på væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) eller Edman-nedbrydningsmetode, som giver dig mulighed for at bestemme aminosyrerne ved de respektive ende af protein af interesse. N-terminal modifikation kan også analyseres ved LC-MS.
Vi har været involveret i proteinstrukturkarakterisering af forskellige store molekyler, herunder rekombinante underenhedsvacciner, nanostoffer/VHH'er/ enkeltdomæne antistoffer (sdAbs), antistoffragmenter, hormoner/peptider, cytokiner, vækstfaktorer (GF), enzymer, kollagener, etc.
Regulatoriske krav til N-terminalsekvensering
I henhold til ICH Q6B-retningslinjerne er det nødvendigt at bekræfte sekvensen af dit protein og undersøge termini for enhver variation, der måtte eksistere.
N terminalsekvenseringsmetoder
Analyse |
Metode |
N-terminal sekventering |
Edman-nedbrydning, væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) |
Procedurer
LC-MS
1. Protein N-terminal fluorescerende mærkning
2. Flere fordøjelser
3. LC-MS/massespektrometri (MS) analyse
Edman nedbrydning
1. Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) gelelektroforese af dit målprotein
2. Overfør gel til polyvinylidenfluorid (PVDF) membraner og farvning
3. Identificer og skær målproteinbåndet
4. Edman-sekventering af N-terminal
5. Dataanalyse