Analyse af N-glykosylieringssteder er afgørende for at forstå funktionerne af glykaner. Yaohai Bio-Pharma bruger Væskechromatografi-Massespektrometri (LC-MS) efter enzymatisk klipping til N-glykosylieringssteder.
Vi har været inddraget i karakteriseringen af proteinstrukturen for forskellige store molekyler, herunder Rekombinante Subenhedsvaciner, Nanokroppe/VHH'er/Enkelt-domæne-antistoffer (sdAbs), Antibiotikfragmenter, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Vækstfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener osv.
Reguleringskrav for N-Glykosylieringssted
I overensstemmelse med ICH Q6B-vejledning, "for glykoproteiner bestemmes karbohydratholdningen (nøytrale sukker, aminosukker og sialinsyurer). Desuden analyseres strukturen af karbohydratkæderne, oligosukkermønstret (antenneprofilen) og glykosylieringsstedene på polypeptidkæden i den største udstrækning mulig.
Analytisk metode
Analyse |
Metoder |
N-Glykosyleringsplads |
Væskediffusion-masspektrometri (LC-MS) efter enzymatisk klysning |
Procedurer
1. Enzymspaltning af proteinet ved brug af trypsine eller anden protease
2. Adskil fragmentglykopiptider
3. Bekræft N-glykoslyceringsplaceringen ved LC-MS
4. Analyser data