mRNA er blevet bredt brugt i studier af gen- eller proteinfunktioner. Samtidig er det almindeligt i udviklingen af præventive og terapeutiske biologiske midler. Som en almindelig syntesestrategi for RNA-molekyler, giver in vitro-transkription (IVT) os mulighed for at få tilpassede transskripter effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etableret en række mRNA-synteseteknologier for at levere højkvalitets-RNA, såsom sekvensdesign og -optimering, IVT, renning, lyofilisering og lipidnanopartikel (LNP)-indpakning. Alle produkter udløses under strenge kvalitetskontrol (QC)-standarder.
Med udbruddet af COVID-19-pandemien i 2020 har mRNA-teknologien fremskridt i store strøg, og dets relaterede forskning og anvendelser har opnået en uforudset udvikling, herunder præventive vacciner til forebyggelse af smitsomme sygdomme, terapeutiske kræftvacciner og -midler, tumerterapi, proteinfremstillingsterapi, regenerativ medicin og celle- og geneterapi (CGT).
mRNA-vaccine | mRNA-terapeutika |
|
Proces | Valgfrit Tjenesteudbud | Servicedetaljer | Leveringsperiode (arbejdsdag) | Aflevering |
design og optimering af mRNA-sekvenser | Design og optimering af kodende sekvenser | CDS-sekvensdesign og codonoptimering | 1-3 | Sekvensfil |
Design og optimering af ikke-kodende sekvenser | Design og optimering af UTR, polyA-sekvenser | |||
Transskriptionsplasmidforberedelse | Rekombinant plasmidforberedelse | Genetisk syntese | 7-10 | |
Plasmidforstærkning og -udtrækning | 4 | |||
Plasmidlinearisering og -rensering | ||||
mRNA In Vitro Transkription | Ko-transkriptionel capping (en-trin-metode) | In vitro transkription (IVT) / Cap analog | 1-2 | N/A |
Nukleotidmodifikationer (UTP/CTP-modifikationer) | ||||
Fjernelse af DNA-skabelon (DNase I) | ||||
Enzymatisk capping (to-trins proces) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidmodifikationer (UTP/CTP-modifikationer) | ||||
Fjernelse af DNA-skabelon (DNase I) | ||||
mRNA-rening (lithiumchlorid/magnetiske partikler) | ||||
Enzymatisk capping | ||||
mRNA Renning | Konventionel reningsmetode | Lithiumchlorid-præcipitation | 1 | mRNA-væskepræparat |
Rening med magnetiske partikler | ||||
Rening med chromatografi kolonne | Kombination af flere chromatografi-metoder | 1-2 | ||
Bufferudskiftning | Ultrafiltrering | 1 | ||
mRNA Lyophilisering | Lyofilisering | Forfrynsning | 2-3 | mRNA lyofiliseret pulver |
Primær tørning (sublimation) | ||||
Sekundær tørning (desorption) | ||||
mRNAIndkapsling | LNP Indkapsling | LNP Indkapsling | 2-3 | mRNA-LNPMedicinprodukt |
Koncentration og bufferudskiftning | ||||
mRNA-kvalitetsanalyse | mRNA råstof / lyofiliseret pulver | Koncentration, renhed | 1 | Prøvesedling |
Integritet, capping effektivitet, polyA halefordeling | 2-5 | |||
mRNA-LNP lægemiddelprodukt | Indkapslings-effektivitet | 1 | ||
Partikelstørrelse og -fordeling | ||||
Overflade-ladning | ||||
mRNA-udtryksvalidering | 293T celle evaluering | Celleplating | 4 | |
Transitorisk transfektion af celler | ||||
Observation af fluorescenssignal | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Enzym-koplet immunassay (ELISA) |
5' Cap |
▪ Uencapped ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, enzymatisk capping |
5’ UTR\/3’ UTR |
▪ Natur UTR-sekvens ▪ Mutant\/Designet UTR-sekvens |
3' PolyA hale |
▪ 100A ~120A Hale (anbefalet) ▪ Segmenteret polyA hale ▪ Andre tilpassede haler |
Ændrede nukleosider |
▪ Uændrede baser ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosin (m5C) ▪ 5-methyluridin (m5U) ▪ 5-methoxyuridin (5moU) ▪ 2-thiouridin (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Andre modificeringer |
Integreret serviceflow
Leverer en række services fra sekvensdesign på foran til mRNA-forberedelse, kvalitetskontrol og udtryksvalidering på baggrunden.
Internationalt førende sekvensdesign og optimering
Professionel design og optimering af mRNA-sekvenser gør det muligt at opnå effektiv mRNA-udtrykning.
Diversificerede Nukleotidmodifikationer
Effektivt forøger mRNA-udtrykningen og reducerer ugunstige immunresponser mod mRNA.
Materiel Raffinationsplatform
Ved at kombinere en konventionel og selvdesignet raffineringsmetode, opnås mRNA-prøver med høj renehed.
Komplet QC-platform
Forbedrer QC-muligheder for at opfylde kravene til rutinetests, såsom koncentration, A260/280-renehed og integritet, samt høj kvalitetskontrol, såsom effektivitet af capping/polyA-fordeling.
HURTIG LEVERING
Tilpasset mRNA kan leveres på mindre end 7 dage, undtagen eksternt bestilt sekvenssyntese.