Produkterne, der opnås ved cirkulering in vitro og RNase R-forerkræftning, kræver yderligere fjernelse af in vitro-transkription (IVT), herunder uforbrugte substrater i cirkulationsreaktionen, reaktionsbivirkninger og skadede RNA.
Yaohai Bio-Pharma har modne LiCl-nedsetting, magnetbejrnsrenning, selvudviklet renning og andre diversificerede renningsløsninger til effektivt at fjerne forskellige forurenninger og forberede højgradigt rent circRNA.
Renningsløsning til små mængder circRNA til celletransfektion og som en del af dyreforsøg.
Renningssolution til små mængder circRNA til celletransfektion og som en del af dyreforsøg.
Anvendelsesscenarier med højere kvalitet;
Stabil og skalérbar renningsproces for at opfylde GMP-produktionskrav.
Proces | Valgfrit Tjenesteudbud | Servicedetaljer | Leveringsperiode (Dag) | Leverancer |
circRNArengøringsmetode | Konventionel rensningsløsning | Lithiumchlorid-præcipitation | 1 | circRNA råstof |
Rening med magnetiske partikler | ||||
Højgradigt Rent circRNA Renning | Forberedende højtydende væskeskilning (HPLC) | 1-2 | ||
Bufferudskiftning | Ultrafiltrering | 1 | ||
circRNA-kvalitetskontrol | Koncentration/purificering | Ultraviolet (UV) Spektrofotometri | 0.5 | Prøvesedling |
Renhed | Agarose Gelelektrofores (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - valgfri | 1 |
Anvendelsesscenarier kan opnås.
circRNA med en renhed på mere end 90%;
Gennem stram kontrol af RNases i det eksperimentelle miljø og forbrugsmateriale, forhindres RNA-degradation effektivt.
Yaohai Bio-Pharma har etableret en moden circRNA-reneprocesløsning, der kan fjerne forskellige procesrelaterede forurenninger effektivt.
De cirkulære RNA-produkter, der er renset ved hjælp af den konventionelle løsning, er stadig tydeligt blandet med knyttet RNA og introner.
Efter reneprocessen udviklet af Yaohai Bio-Pharma kan forskellige lineære RNA-forurenninger, såsom knyttet RNA og introner, fjernes med succes.
validering af circRNA-udtryk
Ved hjælp af en konventionel liposom transfecteres renset eGFP circRNA ind i 293T-celler, og der opdages et fluorescenssignal efter 24 timer, hvorefter det forstærkes yderligere efter 48 timer. Fluorescenssignalet kan stadig detekteres på syvende dag og fjortende dag efter transfektionen.