CircRNA-forberedelse kræver lineær RNA som præcursormateriale (RNA-præcursoren) til cyclering, hvor RNA-præcursoren normalt forberedes ved hjælp af lineariseret plasmid-DNA som en transskriptionsmal og transkriberes in vitro med hjælp fra T7 RNA-polymerase.
Høj kvalitet plasmid-DNA er afgørende for transskription in vitro (IVT). På baggrund af den modne plasmidforberedelsesplatform kan Yaohai Bio-Pharma levere en service til forberedelse af høj rene og standard lineariseret plasmid-DNA (pDNA) for at sikre integriteten af IVT-produkterne.
Tjenesteoplysninger
| Proces |
Valgfrit Tjenesteudbud |
Servicedetaljer |
Leveringsperiode (arbejdsdag) |
| Forberedelse af cirkulære plasmider |
Genetisk syntese |
GeneSyntese (Tredjepart) |
7-10 |
| Plasmidforstærkning |
Plasmidforstærkning |
2 |
| Plasmidudtrækning |
| Forarbejdning af lineære plasmider |
Plasmidlinearisering og -rensering |
Plasmidlinearisering |
1 |
| Lineariseret DNA-reneffektivering |
| Kvalitetskontrol af plasmid-DNA |
Koncentration hensyn |
Ultraviolet (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plasmidkonformation |
Agarose gelelektrofores (AGE) |
| Kapillær_elektrofores (CE) - Valgfri |
| Plasmididentifikation |
Restriktionsenzyme identifikation/AGE |
Vores træk
Flexible valg af lineariseringsmetoder
Optimering af metoderne for DNA-udtrækning og -rensnings for at opnå høje genskabsrater.
Strikte proceskontrolstandarder, med en superhelikal konformationsrate på plasmidprøver til forskning på over 80%.
- Modeneret Platform Proces
Høj standard og effektiv plasmidforberedning og kvalitetskontroltjenester for at opfylde eksperimentelle behov.
Case studie
Ved brug af Yaohai Bio-Pharmas produkt mCherry circRNA som eksempel, er supercoiled-forholdet af transskriptionsplasmidprøver (forskningsgrad) mere end 70%, med en lineariseringsrate på næsten 100%.
mCherry circRNA forberedes med lineariseret plasmid som skabelon og transfekteres ind i 293T-celler. Et højt niveau af fluorescensudtryk (rød fluorescens) opdages efter 24 timer fra transfektionen, hvilket vil blive forstærket efter 48 timer, og kan stadig opdages på den 7. dag og den 14. dag efter transfektionen.
mCherry-proteinet udtrykkes stabil og effektivt, og renheden af transskriptionsskabelonen kan opfylde kravene til circRNA-lægemiddelprodukt (DP) af høj kvalitet.
In vitro validering af mCherry circRNA-udtryk
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
