Ifølge det centrale dogme er messenger RNA (mRNA) broen for overførsel af genetisk materiale fra DNA til proteiner.
mRNA spiller en biologisk rolle ved at kode for proteiner in vivo, og modent mRNA i eukaryote organismer består af fem komponenter: 5' Cap (cap struktur), 5' UTR (ikke-kodende region), ORF (åben læseramme), 3' UTR og 3' polyA-hale (polyadenylat-hale).
Tjenester detaljer
| Proces |
Valgfri service |
Service detaljer |
Leveringsperiode (dag) |
| mRNA sekvens design og optimering |
Design og optimering af kodningssekvenser |
CDS-sekvensjustering
CDS codon optimering
|
1 |
| Design og optimering af ikke-kodende sekvenser |
5' UTR sekvens design og optimering
3' UTR sekvens design og optimering
polyA sekvensdesign og optimering
|
1-2 |
Tilpasningsindstillinger
| 5' UTR/3' UTR |
- Natur UTR-sekvens
- Mutant/Engineered UTR-sekvens
|
| 3' PolyA hale |
- 100A ~120A hale (anbefalet)
- Segmenteret polyA hale
- Anden Custom hale
|
Fælles strategier for mRNA-sekvensdesign
| mRNA-komponenter |
Biologiske funktioner |
Optimeringsstrategier |
| 5' Cap |
Beskyt mRNA mod nedbrydning af exonukleaser og ager sammen med polyA-halen i 3'-enden, polyA-bindende protein og translationsinitieringsfaktorprotein for at initiere proteintranslation. |
Den naturlige Cap1-struktur undgår mønstergenkendelsesreceptorer og reducerer dermed den naturlige immunrespons, som kan opnås ved et-trins co-transkriptionel capping eller to-trins enzymatisk capping [se mRNA enzymatisk capping og co-transcriptional capping for detaljer]. |
| 5' UTR |
5' UTR kan genkendes af ribosomer, regulere translationen af mRNA og påvirke stabiliteten af mRNA. |
Indeholder Kozak-sekvenser uden en meget stabil sekundær struktur. Naturlige UTR'er af højt udtrykte gener foretrækkes til in vitro transkription (IVT) mRNA'er, såsom a-globin og β-globin. |
| CDS |
Proteinkodende regioner og kodende sekvenser for antigener, antistoffer eller andre funktionelle proteiner. |
Kodonoptimering øger translationsniveauet, idet det bemærkes, at visse ikke-optimale kodoner kan spille en rolle i proteinfoldning. |
| 3' UTR |
Reguler mRNA-translation og stabilitet. |
Naturlige UTR'er af højt udtrykte gener foretrækkes til IVT-mRNA'er, såsom a-globin og β-globin. |
| 3' polyA hale |
Reguler proteinekspression og beskyt hættens struktur mod nedbrydning. |
Tilstrækkelig længde (100-150 bp) er påkrævet; kodende polyA-hale på transkriptionsskabelonplasmidet sikrer en mere defineret polyA-halelængde. |
Vores egenskaber
- Diversificeret UTR-kildevalg
Flere kilder til højt udtrykte naturlige & modificerede UTR-biblioteker; moden UTR modifikationsstrategi;
- Avanceret CDS-optimeringsteam
Samarbejd med et professionelt AI-algoritmeteam for at fuldføre optimeringen af kodoner.
Tilføj polyA-sekvenser i henhold til DNA-skabeloner for at kontrollere mRNA-længden mere præcist.
- Diversificerede optimeringskombinationer
Opnå effektiv ekspression af mRNA med lav immunogenicitet.
Case study
Sekvensdesign af et dobbelt-reporter-mRNA: mCherry-eGFP-mRNA
Yaohai Bio-Pharmas mRNA-service bliver fortsat opgraderet med design og optimering af en dobbeltreportergen-tandemsekvens, som opnår co-ekspression af dobbelte gener.
Ved hjælp af et konventionelt transfektionsreagens transficeres den dobbelte gen-tandemsekvens mCherry-eGFP mRNA ind i 293T-celler, og to fluorescerende signaler af mCherry (rød) og forstærket grønt fluorescerende protein (eGFP) detekteres med samtidig ekspression efter 48 timer, og de stables grafen er fremhævet med gult.
Ekspression af mCherry-eGFP mRNA i 293T celle
DA
EN
AR
HR
CS
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
INGEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
