Deamidation af glutamin og asparagin sidenæve er en almindelig modification i forhold til dens indvirkning på egenskaberne ved proteine biopharmaceutika. Deamidation kan ske i glutamin rester, men normalt på et meget lavere niveau. Deamidationshastighederne påvirkes af temperatur, pH, lokal proteinstruktur og flanking aminosyre rester.
Yaohai BioPharma tilbyder testning af aminosyre deamidation, hvilket giver dig mulighed for at opdage aminosyre deamidation ved Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS).
Vi har været involveret i Protein Strukturel Karakterisering af forskellige store molekyler, herunder Rekombinerende Subunit Vacciner, Nanobodies/VHHs/Single-domain Antibodies (sdAbs), Antibody Fragmenter, Hormoner/Peptider, Cytokiner, Vækstfaktorer (CF), Enzymer, Collagens, osv.
Reguleringskrav for Aminosyre Deamidation
I overensstemmelse med ICH Q6B-vejledninger kan deamiderede former opdagtes og karakteriseres ved chromatografiske, elektroforetiske og/eller andre relevante analytiske metoder.
Analytiske metoder
| Analyse |
Metoder |
| Deamidation |
Væskeskromatografi-Masseanalyse (LC-MS) |
Procedurer
f.eks., aspartat-deamidation
1. Enzymisk fordøjning
2. LC-MS under High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) betingelser
3. Datanalyse
Asparagin-deamidation foregår via en succinimid-intermediær (Suc), som er følsom overfor racemisering og hydrolyse, hvilket giver fire Asp-isomere, herunder L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp og D-IsoAsp.
I teorien kunne Gln-deamidation generere fire tilsvarende Glu-isomere gennem en proces lignende Asn-deamidation.
Den højopløsnings masse-spektrometri identifierer let den 1-Da masseforskel mellem Asn/Gln-indholdende peptider og deres tilsvarende deamiderede modparter Asp/Glu.
DA
EN
AR
HR
CS
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
