Betydningen af stammescreening
Screening af egnede værter er nødvendig for biologisk CMC-udvikling, som bestemmer kvaliteten og konsistensen af produktet og fremstillingsprocessen. Det direkte formål med værtsscreening er at tilvejebringe en kandidat primær cellebank (PCB) med høje ekspressionsniveauer og høj stabilitet både med hensyn til passagestabilitet og opbevaringsstabilitet. Screeningen af en passende vært er nødvendig af to hovedårsager:
- For det første at vælge den mikrobielle vært med et højt ekspressionsniveau. Der er flere kommercielt tilgængelige stammer, som bruges til at udtrykke forskellige typer proteiner, såsom toksiske proteiner, opløselige proteiner eller eukaryote proteiner.
- For det andet at screene værten med genetisk stabilitet. Test af genetisk stabilitet er et nøglepunkt gennem hele produktionslivscyklussen. Det foreslås, at høj genetisk stabilitet anerkendes som en anden nøglekarakteristik for passende stamme.
Nøgleord: mikrobiel stammeudvælgelse, mikrobiel stammescreening, high-throughput screening af bakterier eller gær, højproducerende stammescreening, højstabil stammescreening, genetisk stabil stammescreening Anvendelse: humanmedicin, dyremedicin, vaccine, syntetisk biologi, rekombinant stort molekyle biologiske lægemidler, biologisk reagens
Strain Screening Services af Yaohai Bio-Pharma
Ved at drage fordel af over 10 års CDMO-erfaring inden for mikrobiel biologi støtter vi udvikling og fremstilling af forskellige store molekyler, herunder rekombinante underenhedsvacciner, viruslignende partikler (VLP), hormoner (insulin, GLP-1, væksthormon), cytokiner ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), vækstfaktorer (EGF, FGF, NGF), nanobodies/Single-domæne antistoffer (sdAbs), enzymer osv.
Vi har akkumuleret rig erfaring med udvælgelse af forskellige typer plasmidvektorer og mikrobielle værter, herunder bakterier Escherichia coli (E. coli), og gær Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Vi kan finde det bedste udtrykssystem til dine unikke biologiske lægemidler.
Vi indsamlede forskellige mikrobielle værter med klare kilder og standard CoA, bl.a E.coli udtryk og gærudtryk.
Service detaljer
|
Tjenester
|
Service detaljer
|
Minimum tidslinje/dag
|
Leverancer
|
|
Stammekonstruktion (E. coli)
|
Plasmid transformation (multi-værter)
|
5
|
COA for kommercielle værter Strain konstruktionsrapport
|
|
PCR verifikation
|
|
Stammeoprensning
|
|
Stammebevarelse
|
|
Stammekonstruktion (gær)
|
Fremstilling af kompetente gærceller
|
10
|
|
Plasmid linearisering
|
|
Elektro transformation
|
|
Resistens/Ernæringsmangel screening
|
|
Stammeoprensning
|
|
Stammebevarelse
|
|
Egnet værtsscreening
|
Plasmid- eller genom-DNA-ekstraktion
|
15-20
|
VærtsscreeningsprocesCOA af konstruerede stammer
|
|
PCR-verifikation, restriktionsenzymfordøjelse
|
|
Målgensekventering
|
|
Screening af højekspressionsværter
|
|
Screening af værter med genetisk stabilitet
|
|
Stammebevarelse
|
Case study
En egnet vært forbedrer proteinekspressionsniveauet med 2.5 gange.
Vi har fået til opgave at udvikle højproducerende E. coli stamme. Og vi prøvede tre typer reklamer E. coli værter baseret på målproteinets egenskaber. Det er vist, at stammen S1-1 og S1-2 (Fig A: Bane 1,2) forbedrede proteinniveauet til 3.5 gange end klientens oprindelige stamme (Fig A: Bane 3).
Desuden udførte stammen S1-1 høj genetisk stabilitet (Fig. B), og den blev anerkendt som kandidatstamme til primær cellebanking (PCB).
Vores servicefunktioner
Demonstreret ekspertise med forskellige mikrobielle værter, f.eks. E. coli DH5a, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink stamme 1/2/3/4; S. cerevisiae og H. polymorpha.
Vi har erfaring med E. coli periplasmatisk sekretion, opløselig og inklusions kropsekspression, såvel som gær intracellulær eller sekretionsekspression. Vi tilføjer ingen antibiotika eller tilføjer antibiotika under regulatorisk vejledning.
Vi etablerer en screeningsplatform med høj kapacitet til at screene højproducerende og stabile stammer fra over hundrede kandidatstammer.
Det sikres, at processen med strain engineering og screening er sporbar under God Data- og Record Management.
DA
EN
AR
HR
CS
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
INGEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
