Enzymatisk reagens

Modalitet

Tag Fjernelse Proteaser

For at forbedre opløseligheden og forenkle oprensningsprocessen af rekombinante proteiner tilføjer forskere normalt fusionstags, hvoraf His-tag, maltosebindende protein (MBP) og glutathion-S-transferase (GST) almindeligvis anvendes.

Mens mærket som en ekstra sekvens af protein, bør det fjernes for at opretholde biologisk aktivitet i den farmaceutiske industri. Fjernelse af fusionsmærker kræver stedspecifikke proteaser, såsom enterokinase (EK), thrombin, tobaksætsvirusprotease (TEVp), human rhinovirus protease 3C (HRV3C), lille ubiquitin-modificerende protein (SUMO) protease, tobaksvene-brogevirus ( TVMV) protease og carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).

Type	Enzym	Anerkendelsessted
Tag fjernelse endoproteaser	Enterokinase (EK), Enteropeptidase	DDDDK↓
	Thrombin	LVPR↓GS
	TEV protease	ENLYFQ↓G
	HRV3C protease	LEVLFQ↓GP
	SUMO protease	SUMO tertiær struktur
	TVMV protease	ETVRFQG↓S
Tag fjernelse exoproteaser	Carboxypeptidase A (CPA)	C-terminale aminosyrer, undtagen Pro, Lys og Arg
Tag fjernelse exoproteaser	Carboxypeptidase B (CPB)	C-terminal Lys og Arg

Andre proteaser

Anvendelse	Enzym	Funktion
Andre proteaser	Protease K	En serinprotease, der fordøjer proteiner ved at hydrolysere peptidbindinger.
	IdeS, IgG-protease	IgG-nedbrydende enzymer (Ides), der spalter på et specifikt sted af immunoglobulin G (IgG), og danner Fab- og Fc-fragmenter
	IgA1-protease	Et proteolytisk enzym, der spalter specifikt sted i den humane immunglobulin A1 (IgA1) hængselregionsekvens.

Nuklease

Anvendelse	Enzym	Funktion
Nuklease	Nuklease	Spalter nukleinsyrer (DNA eller RNA) ved at hydrolysere phosphodiesterbindingerne.
Nuklease	Begræns enzymet	En endonuklease, der spalter DNA på eller nær specifikke steder.

Amidase

Anvendelse	Enzym	Funktion
Amidase	PNGase F	Spalter mellem de inderste GlcNAc- og asparaginrester af høj mannose-, hybrid- og komplekse oligosaccharider.

alle kategorier

Enzymatisk reagens

Modalitet