Nøglenzymer til lang-RNA-produktion
mRNA, som en type lang kodende RNA, udførte sikkert og effektivt i et bredere omfang af mennesker under COVID-19. Andre lange kodende RNAs, såsom selv-forstærkende RNA (saRNA) og cirkulær mRNA (circRNA), viste også effektivitet i prækliniske og kliniske studier.
Storskala produktion af lang-kodende RNA afhænger af in vitro transkription (IVT) gennem flere enzymatiske reaktioner. Trinene i RNA-produktionen inkluderer forberedelse af skabelon-DNA, IVT RNA-syntese, cirkulation, DNA-fjernelse, RNA-modifikation (capping og tailing) og RNA-rening.
Der anvendes flere nøglenzymer i produktionen af lang kodende RNA (f.eks. mRNA, saRNA og circRNA), herunder restriktionsendonukleaser, T7 RNA-polymerase (T7 RNAP), RNase-hæmmer, inorganisk pyrofosfatase, DNase I, vaccinia-capping-enzyme og RNase R.
|
Proces
|
Enzym
|
Funktion
|
|
Forberedelse af skabelon-DNA
|
Restriktionsendonukleaser
|
Linearisering af plasmid-DNA (pDNA) for at undgå oprettelse af længere transkript.
|
|
IVT RNA-syntese
|
T7 RNA polymerase (T7 RNAP)
|
Bind til T7-promotor og generer specifikt RNA-transkript; Spiller en nøglerolle under IVT-reaktionen.
|
|
RNase-hæmmer, rekombinant
|
Hæmmer RNase-aktivitet under IVT-reaktionen.
|
|
Pirifosfatase, inorganisk (iPPase)
|
Forhindre pirifosfat under IVT-reaktionen.
|
|
DNA fjernelse
|
DNase I
|
Fjern DNA-skabelonen.
|
|
RNA-modifikation
|
Vaccinia capping enzyme
|
Tilføj Cap1-strukturer til de 5′ ender af IVT-mRNA.
|
|
2’-O-Methyltransferase
|
| circRNA-forøgelse |
RNase R |
Forarbejd linær RNA og berige cirkulær RNA. |
Yaohai Bio-Pharma tilbyder en komplet CDMO-løsning for enzym
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
