Enzymatisk reagens

Enzymatisk reagens

Modalitet

Tag-fjerne proteaser

For at forbedre oppløseligheden og forenkle renningsprocessen af rekombinante proteiner, tilføjer forskere normalt fusionstags, hvoraf His-tag, maltoz-bindende protein (MBP) og glutathion-S-transferase (GST) er almindeligt brugte.

Selvom tagget er tilføjet som en ekstra sekvens af protein, skal det fjernes for at opretholde den biologiske aktivitet i farmaceutisk industri. Fjernelsen af fusionstags kræver stedsspecifikke proteaser, såsom enterokinase (EK), trombin, tobacco etch virus protease (TEVp), human rhinovirus protease 3C (HRV3C), small ubiquitin modifying protein (SUMO) protease, tobacco vein mottling virus (TVMV) protease og carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).

TYPENAVN	Enzym	Genkendelsessite
Tag-fjernende endoproteaser	Enterokinase (EK), enteropeptidase	DDDDK↓
	Trombin	LVPR↓GS
	TEV protease	ENLYFQ↓G
	HRV3C protease	LEVLFQ↓GP
	SUMO protease	SUMO tertiær struktur
	TVMV protease	ETVRFQG↓S
Tag fjernelse exoproteaser	Carboxypeptidase A (CPA)	C-terminal amino syrer, undtagen Pro, Lys og Arg
Tag fjernelse exoproteaser	Carboxypeptidase B (CPB)	C-terminal Lys og Arg

Andre proteaser

Anvendelse	Enzym	Funktion
Andre proteaser	Protease K	En serinprotease, der fordøer protein ved hydrolyse af peptidbindinger.
	IdeS, IgG-protease	IgG-fordelende enzym (Ides), der kliver på et specifikt sted i immunoglobulin G (IgG), hvilket genererer Fab- og Fc-fragmenter
	IgA1-protease	Et proteolytisk enzym, der kliver på en specifik sted i sekvensen af hingeregionen af menneskelig immunoglobulin A1 (IgA1).

Nuclease

Anvendelse	Enzym	Funktion
Nuclease	Nuclease	Fordeler nucleinsyran (DNA eller RNA) ved hydrolyse af fosfodiesterbindingerne.
Nuclease	Restriktionsenzyme	En endonuklease, der klipper DNA ved eller nær specifikke steder.

Amidase

Anvendelse	Enzym	Funktion
Amidase	PNGase F	Kliver mellem den indre GlcNAc og asparaginresiduerne af høj mannose-, hybrid- og komplekse oligosaccharider.

Alle kategorier

Enzymatisk reagens

Modalitet