הפטיטיס C היא מחלת כבד הנגרמת על ידי וירוס הפטיטיס C (HCV), המועבר דרך הדם של אדם נגוע. ברחבי העולם, כ-58 מיליון אנשים נגועים בנגיף הפטיטיס C, עם כ-1.5 מיליון חולים חדשים מדי שנה. דלקת כבד כרונית C מדביקה כ-3.2 מיליון אנשים צעירים ועלולה לגרום לדלקת כבד חריפה וכרונית כאחד, אשר עשויה לכלול מחלה קלה ומחלה קשה לכל החיים כגון שחמת כבד וסרטן (קרצינומה כבדית ולימפומות). בשונה מהפטיטיס A ו-B, אין כיום חיסון לנגיף הפטיטיס C.
בהיותו וירוס קטן, עטוף, בעל חוש חיובי RNA חד-גדילי (ssRNA) השייך למשפחת Flaviviridae, חלקיק נגיף ההפטיטיס C מורכב ממעטפת קרום שומנים בקוטר של 55 עד 65 ננומטר.
הגנום של HCV מורכב ממסגרת קריאה בודדת פתוחה שאורכה הוא 9600 בסיסי נוקלאוטידים; החלבונים המבניים של HCV הם חלבון הליבה, חלבוני המעטפת E1 ו-E2, והחלבונים הלא מבניים מכילים NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A ו-NS5B. החלבונים של הנגיף מנוהלים בסדר הבא לאורך הגנום: N terminal- core antigen (HCVcAg)-E1–E2–p7- NS2–NS3–NS4A–NS4B–NS5A–NS5B–C terminal.
אנטיגן ליבת HCV (HCVcAg)
בהיותו פוספופרוטאין מבני של קפסיד HCV, אנטיגן הליבה של HCV (HCVcAg) מורכב מ-191 חומצות האמינו הראשונות של הפוליפרוטאין הנגיפי. אנטיגן הליבה של וירוס הפטיטיס C נשמר מאוד על פני הגנוטיפים של HCV. הם קיימים בכל הנגיף ובמבני חלבון ליבה ללא RNA.
חלבוני מעטפה (E1 ו-E2)
E1 ו-E2 הם שני גליקופרוטאין של מעטפת ויראלית המוטבעים במעטפת השומנים. שניהם אחראים על התקשרות ויראלית וכניסה לתאים. בתוך המעטפה יש ליבה איקוסהדרלית בקטרים של 33-40 ננומטר.
חלבונים לא מבניים
כחלבון בעל ממברנה של 63 חומצות אמינו, חלבון NS1 (p7) ממלא תפקיד חשוב במורפוגנזה של וירוסים. NS2 הוא חלבון טרנסממברני עם פעילות פרוטאז ו-NS3 הוא חלבון של 67 kDa עם פעילות סרין פרוטאז במסוף ה-N ומהווה קומפלקס הטרודימרי עם NS4A, המשמש כקופקטור פרוטאיז. NS4B חיוני לגיוס חלבונים ויראליים אחרים. NS5A, כפוספופרוטאין הידרופילי, חיוני לשכפול ויראלי, אפנון של מסלולי איתות של תאים ותגובת האינטרפרון. החלבון NS5B הוא RNA פולימראז תלוי RNA.
יישום של אנטיגנים HCV
ישנם אנטיגנים של HCV ליישום בבדיקות נוגדנים נגד HCV לאיתור נוגדנים נגד HCV בדם. בדיקת נוגדנים נגד HCV בבדיקה סרולוגית מזהה חולים שנדבקו בנגיף. מבחן האנטי-HCV נועד לזהות תורמים אנושיים כגון תורמים מתנדבים של דם מלא ורכיבי דם, ותורמים חיים אחרים לנוכחות אנטי-HCV.
ערכת ריאגנטים PRISM HCV
בדיקת ABBOTT PRISM HCV משמשת לזיהוי איכותי של נוגדנים לנגיף הפטיטיס C (אנטי-HCV) בדגימות נסיוב ופלזמה אנושיים, בהיותו בדיקה חיסונית כימי-אורנית חוץ גופית (ChLIA). הערכה מכילה אנטיגנים רקומביננטיים, כולל חלבון ליבה וחלבונים לא מבניים (NS3, NS4 ו-NS5), ולכן ניתן ליישם אותה כדי לזהות נוגדנים נגד אנטיגנים אלו.
חלבון HCr43 הוא חלבון היתוך המורכב מחלבון ליבה של HCV ומאזור לא מבני HCV 3 (NS3) המתבטאים ב Escherichia coli (E. coli).
החלבון c100-3 מתבטא ב Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) כחלבון היתוך של NS3, NS4 וסופראוקסיד דיסמוטאז (SOD).
חלבון ההיתוך NS5-SOD מתבטא גם ב Saccharomyces cerevisiae.
ערכת ריאגנטים נגד HCV של Alinity
כערכה נוספת לבדיקת אנטי-HCV במערכת של Alinity, מבחן Anti-HCV של Alinity מורכב מאנטיגנים רקומביננטיים שמקורם ב-HCV (c100-3, HCr43) המיוצרים ב- החיידק ושמרים. בדיקת Anti-HCV של Alinity מיועדת לאיתור נוגדנים כנגד חלבון הליבה, אזורי NS3 ו-NS4 בגנום HCV.
Yaohai Bio-Pharma מציעה פתרון CDMO חד פעמי לאנטיגן HCV