פרוטאזות להסרת תגים
כדי לשפר את המסיסות ולפשט את תהליך הטיהור של חלבונים רקומביננטיים, חוקרים בדרך כלל מוסיפים תגי היתוך, שמתוכם נעשה שימוש נפוץ ב-His-tag, חלבון קושר מלטוז (MBP) וגלוטתיון-S-טרנספראז (GST).
בעוד שהוא מתויג כרצף נוסף של חלבון, יש להסיר אותו כדי לשמור על פעילות ביולוגית בתעשיית התרופות. הסרת תגי היתוך דורשת פרוטאזות ספציפיות לאתר, כגון אנטרוקינאז (EK), תרומבין, פרוטאז של נגיף טבק (TEVp), פרוטאז רינוווירוס אנושי 3C (HRV3C), פרוטאז של חלבון משנה יוביקוויטין קטן (SUMO), וירוס ורידי טבק ( TVMV) פרוטאז, ו-carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).
סוּג
|
אנזים
|
אתר הכרה
|
הסרת תג אנדופרוטאזות
|
Enterokinase (EK), Enteropeptidase
|
DDDDK↓
|
טרומבין
|
LVPR↓GS
|
פרוטאז TEV
|
ENLYFQ↓G
|
פרוטאז HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
פרוטאז SUMO
|
מבנה שלישוני SUMO
|
פרוטאז TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
הסרת תגים exoproteases
|
Carboxypeptidase A (CPA)
|
חומצות אמינו מסוף C, מלבד Pro, Lys ו- Arg
|
Carboxypeptidase B (CPB)
|
C-terminal Lys ו-Arg
|
פרוטאזות אחרות
בקשה
|
אנזים
|
פונקציה
|
פרוטאזות אחרות
|
פרוטאז ק
|
פרוטאז סרין המעכל חלבונים על ידי הידרוליזה של קשרי פפטידים.
|
IdeS, IgG פרוטאז
|
אנזימים מפרקי IgG (Ides) שמתפצלים באתר ספציפי של אימונוגלובולין G (IgG), ויוצרים שברי Fab ו-Fc
|
IgA1 פרוטאז
|
אנזים פרוטאוליטי המבקע אתר ספציפי ברצף אזור הצירים של אימונוגלובולין אנושי A1 (IgA1).
|
Nuclease
בקשה
|
אנזים
|
פונקציה
|
Nuclease
|
Nuclease
|
מבקע חומצות גרעין (DNA או RNA) על ידי הידרוליזה של קשרי הפוספודיסטר.
|
הגבלת אנזים
|
אנדונוקלאז המבקע DNA באתרים ספציפיים או בקרבתם.
|
אמידאז
בקשה
|
אנזים
|
פונקציה
|
אמידאז
|
PNGase F
|
מבקע בין שאריות ה-GlcNAc והאספרגין הפנימיות ביותר של אוליגוסכרידים גבוהים, היברידיים ומורכבים.
|
Yaohai Bio-Pharma מציעה פתרון CDMO חד פעמי עבור מגיב אנזימטי