Rekombináns enzim

Modalitás

Rekombináns enzimek

Rekombináns enzim terápiás használatra

A biotechnológiai eljárásokkal nyert terápiás enzimeket széles körben alkalmazzák számos klinikai alkalmazásban, beleértve az enzimpótló terápiát, a felhalmozódott metabolitok és toxinok lebontását, a rákkezelést és a genomszerkesztést. A mikrobiális expressziós rendszerben számos terápiás enzim állítható elő.

Alkalmazás	Enzimek	Anyag	Tipikus termékek/csővezetékek
Enzimpótló terápia	Adenozin-deamináz, ADA	Adenozin vagy dezoxiadenozin	Elapegademase-lvlr (Revcovi)
Enzimpótló terápia	Fenilalanin ammónia liáz, PAL	fenilalanin	Pegvaliase-pqpz (Palynziq)
A felhalmozódott metabolitok lebontása	Urikáz/urát-oxidáz	Húgysav	Peglticase (Krystexxa) Rasburicase (Fasturtec)
	Kollagenáz	Kollagén "heg"	Clostridium histolyticum kollagenáz (Xiaflex, Qwo, Santyl)
	Csonka plazmin	Kollagén, fibronektin és laminin	Okriplazmin (Jetrea)
	Csonkaszöveti plazminogén aktivátor (tPA)	Plazminogén	Reteplase (Retavase)
	IgG proteáz	Immunglobulin G (IgG)	Imlifidáz (Idefrix)
	IgA proteáz	Immunglobulin A (IgA)	PKU308/AP308IGAN IgA proteáz
A toxinok lebontása	Karboxipeptidáz G2	Metotrexát	Glükarpidáz (Voraxaze)
Rák kezelés	Aszparagin-specifikus enzim	aszparagin	Aszparagináz (Elspar)Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)
Genom szerkesztés	Cas9 nukleáz	Cél gén	Exagamglogene autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Rekombináns enzim mint anyag

Számos enzimet használnak a hosszú kódoló RNS-termelésben (pl. mRNS, saRNS, circRNS), antitest-gyógyszer konjugátumok (ADC) előállításában és mások. A mikrobák által termelt enzimek költséghatékonyabbak, mint az emlőssejtek, különösen az E. coli expressziós rendszer.

Alkalmazás	Enzimek	Funkció
Enzimek a lineáris RNS-termeléshez, RNáz-mentes	Restrikciós endonukleázok	A plazmid DNS (pDNS) linearizálása a hosszabb transzkriptum létrehozásának elkerülése érdekében.
	T7 RNS polimeráz (T7 RNAP)	Kötődik a T7 promoterhez, és specifikus RNS-transzkriptumot hoz létre; Kulcsszerepet játszik az in vitro transzkriptum (IVT) reakció során.
	Vaccinia capping enzim	Adjunk Cap-struktúrákat az IVT mRNS 5'-végeihez.
	Pirofoszfatáz, szervetlen (iPPase)	Kerülje el a pirofoszfát kialakulását az IVT reakció során.
	RNáz inhibitor, rekombináns	Gátolja az RNáz aktivitást az IVT reakció során.
	DNáz I	Távolítsa el a DNS-sablont.
Enzim cirRNS-termeléshez, RNáz-mentes	RNáz R	Emésztse meg a lineáris RNS-t és dúsítsa fel a körkörös RNS-t.
Enzim által közvetített glikán konjugáció	Peptid-N-glikozidáz (PNGáz F)	Elhasítja az amidkötést az első szacharid GlcNAc és az Asn297 oldallánc között; Glikánok felszabadítása az IgG antitestekből.
	Bakteriális transzglutamináz (BTG)	Helyspecifikusan konjugálja a hasznos terheket az ADC-k generálásához.
	Sortase A	Katalizálja a fehérjék ligálását.
	β1,4-galaktozidáz	Szabadítsa fel az összes terminális galaktózt, és képezze az antitest homogén G0 izoformáját.
	β1,4-galaktozil-transzferáz (Gal-T)	Vigyen át egy kémiailag reaktív funkciós csoporttal rendelkező cukormaradékot.
	α2,6-szialiltranszferáz (Sial T)	A terminális sziálsavmaradékokat építse be egy antitest natív glikán szerkezetébe.
Enzim által közvetített glikán-átalakítás és glikomérnöki tevékenység	Endo-N-acetil-glükózaminidáz (ENGáz)	Hidrolizálja az N-glikánok GlcNAcβ1,4–1GlcNAc közötti β4-glikozidos kötését; Távolítsa el az N-kapcsolt glikánokat az IgG antitestek Fc régiójáról.
	Endoglikozidáz S (EndoS)
	Glikozil-transzferázok (GT-k)	Vigye át az N-glikán-oxazolint defukozilált IgG-kbe.
Egyéb	Mikrobatörzs által termelt enzimek	Testreszabott igény

Rekombináns enzim mint reagens

Címkeeltávolító proteázok

Fúziós címkéket gyakran használnak az érdeklődésre számot tartó rekombináns fehérjék oldhatóságának és stabilitásának javítására, és megkönnyítik azok tisztítását. Az általánosan használt címkék közé tartozik a His-tag, a maltóz-kötő fehérje (MBP), a glutation-s-transzferáz (GST) stb.

Jellemzően egy linker szekvenciát adnak a fúziós címke és a célfehérje szekvencia közé a címke eltávolítása érdekében. A fúziós címkék eltávolításához helyspecifikus proteázokra van szükség, mint például enterokináz (EK), trombin, dohánymarás vírus proteáz (TEVp), humán rhinovírus proteáz 3C (HRV3C), kis ubiquitin módosító fehérje (SUMO) proteáz, dohányvéna foltosodás vírus ( TVMV) proteáz és karboxipeptidáz A/B (CPA/CPB).

típus	Enzimek	Felismerési oldal
Címkeeltávolító endoproteázok	Enterokináz (EK), enteropeptidáz	DDDDK↓
	trombin	LVPR↓GS
	TEV proteáz	ENLYFQ↓G
	HRV3C proteáz	LEVLFQ↓GP
	SUMO proteáz	SUMO tercier szerkezet
	TVMV proteáz	ETVRFQG↓S
Címkeeltávolító exoproteázok	Karboxipeptidáz A (CPA)	C-terminális aminosavak, kivéve a Pro, Lys és Arg
Címkeeltávolító exoproteázok	Karboxipeptidáz B (CPB)	C-terminális Lys és Arg

Egyéb proteázok, nukleázok és amidázok

Alkalmazás	Enzimek	Funkció
Egyéb proteázok	Proteáz K	Szerin-proteáz, amely peptidkötések hidrolizálásával emészti fel a fehérjéket.
	IdeS, IgG proteáz	IgG-t lebontó enzimek (Ides), amelyek az immunglobulin G (IgG) meghatározott helyén hasítanak, és Fab és Fc fragmentumokat hoznak létre
	IgA1 proteáz	Proteolitikus enzim, amely a humán immunglobulin A1 (IgA1) csuklórégió szekvenciájának egy specifikus helyét hasítja.
Nukleáz	Nukleáz	A nukleinsavakat (DNS vagy RNS) hasítja a foszfodiészter kötések hidrolizálásával.
Nukleáz	Az enzim korlátozása	Egy endonukleáz, amely meghatározott helyeken vagy azok közelében hasítja a DNS-t.
amidáz	PNGase F	Hasít a legbelső N-acetil-glükózamin (GlcNAc) és a magas mannóztartalmú, hibrid és komplex oligoszacharidok aszparagin-maradékai között.

A Yaohai Bio-Pharma egyablakos CDMO-megoldást kínál rekombináns enzimekhez

Referencia:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Az enzimalapú terápiák múltja, jelene és jövője. Drug Discov ma. 2022. január;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Minden kategória

Modalitás