Rekombináns enzim terápiás használatra
A biotechnológiai eljárásokkal nyert terápiás enzimeket széles körben alkalmazzák számos klinikai alkalmazásban, beleértve az enzimpótló terápiát, a felhalmozódott metabolitok és toxinok lebontását, a rákkezelést és a genomszerkesztést. A mikrobiális expressziós rendszerben számos terápiás enzim állítható elő.
Rekombináns enzim mint anyag
Számos enzimet használnak a hosszú kódoló RNS-termelésben (pl. mRNS, saRNS, circRNS), antitest-gyógyszer konjugátumok (ADC) előállításában és mások. A mikrobák által termelt enzimek költséghatékonyabbak, mint az emlőssejtek, különösen az E. coli expressziós rendszer.
|
Alkalmazás
|
Enzimek
|
Funkció
|
|
Enzimek a lineáris RNS-termeléshez, RNáz-mentes
|
Restrikciós endonukleázok
|
A plazmid DNS (pDNS) linearizálása a hosszabb transzkriptum létrehozásának elkerülése érdekében.
|
|
T7 RNS polimeráz (T7 RNAP)
|
Kötődik a T7 promoterhez, és specifikus RNS-transzkriptumot hoz létre; Kulcsszerepet játszik az in vitro transzkriptum (IVT) reakció során.
|
|
Vaccinia capping enzim
|
Adjunk Cap-struktúrákat az IVT mRNS 5'-végeihez.
|
|
Pirofoszfatáz, szervetlen (iPPase)
|
Kerülje el a pirofoszfát kialakulását az IVT reakció során.
|
|
RNáz inhibitor, rekombináns
|
Gátolja az RNáz aktivitást az IVT reakció során.
|
|
DNáz I
|
Távolítsa el a DNS-sablont.
|
|
Enzim cirRNS-termeléshez, RNáz-mentes
|
RNáz R
|
Emésztse meg a lineáris RNS-t és dúsítsa fel a körkörös RNS-t.
|
|
Enzim által közvetített glikán konjugáció
|
Peptid-N-glikozidáz (PNGáz F)
|
Elhasítja az amidkötést az első szacharid GlcNAc és az Asn297 oldallánc között; Glikánok felszabadítása az IgG antitestekből.
|
|
Bakteriális transzglutamináz (BTG)
|
Helyspecifikusan konjugálja a hasznos terheket az ADC-k generálásához.
|
|
Sortase A
|
Katalizálja a fehérjék ligálását.
|
|
β1,4-galaktozidáz
|
Szabadítsa fel az összes terminális galaktózt, és képezze az antitest homogén G0 izoformáját.
|
|
β1,4-galaktozil-transzferáz (Gal-T)
|
Vigyen át egy kémiailag reaktív funkciós csoporttal rendelkező cukormaradékot.
|
|
α2,6-szialiltranszferáz (Sial T)
|
A terminális sziálsavmaradékokat építse be egy antitest natív glikán szerkezetébe.
|
|
Enzim által közvetített glikán-átalakítás és glikomérnöki tevékenység
|
Endo-N-acetil-glükózaminidáz (ENGáz)
|
Hidrolizálja az N-glikánok GlcNAcβ1,4–1GlcNAc közötti β4-glikozidos kötését; Távolítsa el az N-kapcsolt glikánokat az IgG antitestek Fc régiójáról.
|
|
Endoglikozidáz S (EndoS)
|
|
|
Glikozil-transzferázok (GT-k)
|
Vigye át az N-glikán-oxazolint defukozilált IgG-kbe.
|
|
Egyéb
|
Mikrobatörzs által termelt enzimek
|
Testreszabott igény
|
Rekombináns enzim mint reagens
Címkeeltávolító proteázok
Fúziós címkéket gyakran használnak az érdeklődésre számot tartó rekombináns fehérjék oldhatóságának és stabilitásának javítására, és megkönnyítik azok tisztítását. Az általánosan használt címkék közé tartozik a His-tag, a maltóz-kötő fehérje (MBP), a glutation-s-transzferáz (GST) stb.
Jellemzően egy linker szekvenciát adnak a fúziós címke és a célfehérje szekvencia közé a címke eltávolítása érdekében. A fúziós címkék eltávolításához helyspecifikus proteázokra van szükség, mint például enterokináz (EK), trombin, dohánymarás vírus proteáz (TEVp), humán rhinovírus proteáz 3C (HRV3C), kis ubiquitin módosító fehérje (SUMO) proteáz, dohányvéna foltosodás vírus ( TVMV) proteáz és karboxipeptidáz A/B (CPA/CPB).
|
típus
|
Enzimek
|
Felismerési oldal
|
|
Címkeeltávolító endoproteázok
|
Enterokináz (EK), enteropeptidáz
|
DDDDK↓
|
|
trombin
|
LVPR↓GS
|
|
TEV proteáz
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C proteáz
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO proteáz
|
SUMO tercier szerkezet
|
|
TVMV proteáz
|
ETVRFQG↓S
|
|
Címkeeltávolító exoproteázok
|
Karboxipeptidáz A (CPA)
|
C-terminális aminosavak, kivéve a Pro, Lys és Arg
|
|
Karboxipeptidáz B (CPB)
|
C-terminális Lys és Arg
|
Egyéb proteázok, nukleázok és amidázok
|
Alkalmazás
|
Enzimek
|
Funkció
|
|
Egyéb proteázok
|
Proteáz K
|
Szerin-proteáz, amely peptidkötések hidrolizálásával emészti fel a fehérjéket.
|
|
IdeS, IgG proteáz
|
IgG-t lebontó enzimek (Ides), amelyek az immunglobulin G (IgG) meghatározott helyén hasítanak, és Fab és Fc fragmentumokat hoznak létre
|
|
IgA1 proteáz
|
Proteolitikus enzim, amely a humán immunglobulin A1 (IgA1) csuklórégió szekvenciájának egy specifikus helyét hasítja.
|
|
Nukleáz
|
Nukleáz
|
A nukleinsavakat (DNS vagy RNS) hasítja a foszfodiészter kötések hidrolizálásával.
|
|
Az enzim korlátozása
|
Egy endonukleáz, amely meghatározott helyeken vagy azok közelében hasítja a DNS-t.
|
|
amidáz
|
PNGase F
|
Hasít a legbelső N-acetil-glükózamin (GlcNAc) és a magas mannóztartalmú, hibrid és komplex oligoszacharidok aszparagin-maradékai között.
|
A Yaohai Bio-Pharma egyablakos CDMO-megoldást kínál rekombináns enzimekhez
Referencia:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Az enzimalapú terápiák múltja, jelene és jövője. Drug Discov ma. 2022. január;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
HU
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
