A törzsszűrés jelentősége
A biológiai CMC fejlesztéshez szükséges a megfelelő gazdaszervezetek szűrése, amely meghatározza a termék és a gyártási folyamat minőségét és konzisztenciáját. A gazdaszűrés közvetlen célja egy olyan jelölt elsődleges sejtbank (PCB) biztosítása, amely magas expressziós szintekkel és nagy stabilitással rendelkezik mind az átoltás, mind a tárolási stabilitás tekintetében. A megfelelő gazdaszervezet szűrésére két fő okból van szükség:
- Először is a magas expressziós szinttel rendelkező mikrobiális gazdaszervezet kiválasztása. Számos kereskedelmi forgalomban kapható törzs létezik, amelyeket különböző típusú fehérjék, például toxikus fehérjék, oldható fehérjék vagy eukarióta fehérjék expresszálására használnak.
- Másodszor a gazdaszervezet genetikai stabilitással történő szűrése. A genetikai stabilitás vizsgálata kulcsfontosságú pont a gyártási életciklus során. Feltételezhető, hogy a magas genetikai stabilitást a megfelelő törzs másik kulcsfontosságú jellemzőjeként ismerik el.
Kulcsszavak: mikrobatörzs szelekció, mikrobiális törzsszűrés, baktériumok vagy élesztőgombák nagy áteresztőképességű szűrése, nagy termelésű törzsszűrés, nagyon stabil törzsszűrés, genetikailag stabil törzsszűrés Alkalmazás: humán gyógyászat, állatgyógyászat, vakcina, szintetikus biológia, rekombináns nagymolekula biológiai anyagok, biológiai reagens
A Yaohai Bio-Pharma törzsszűrési szolgáltatásai
Több mint 10 éves CDMO-tapasztalattal a mikrobiológia területén, támogatjuk különböző nagy molekulák fejlesztését és gyártását, beleértve a rekombináns alegység vakcinákat, vírusszerű részecskéket (VLP), hormonokat (inzulin, GLP-1, növekedési hormon), citokineket ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), növekedési faktorok (EGF, FGF, NGF), nanotestek/egydoménes antitestek (sdAb), enzimek stb.
Gazdag tapasztalattal rendelkezünk a különböző típusú plazmid vektorok és mikrobiális gazdák kiválasztásában, beleértve a baktériumokat is. Escherichia coli (E. coli), és élesztőt Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Megtaláljuk a legjobb expressziós rendszert az Ön egyedi biológiájához.
Különféle mikrobiális gazdákat gyűjtöttünk tiszta forrásokkal és szabványos CoA-val, beleértve E.coli kifejezés és élesztő kifejezés.
Szolgáltatás részletei
|
Szolgáltatások
|
Szolgáltatás részletei
|
Minimális idővonal/nap
|
teljesítések
|
|
Törzskonstrukció (E. coli)
|
Plazmid transzformáció (több gazdagép)
|
5
|
Kereskedelmi házigazdák tanúsítványa Törzsépítési jelentés
|
|
PCR ellenőrzés
|
|
Törzs tisztítás
|
|
Törzs megőrzése
|
|
Törzsépítés (élesztő)
|
Kompetens élesztősejtek előkészítése
|
10
|
|
Plazmid linearizáció
|
|
Elektromos transzformáció
|
|
Rezisztencia/tápanyaghiány-szűrés
|
|
Törzs tisztítás
|
|
Törzs megőrzése
|
|
Megfelelő gazdaszűrés
|
Plazmid vagy genom DNS extrakció
|
15-20
|
Gazdaszűrési folyamat A mesterséges törzsek COA-ja
|
|
PCR verifikáció, restrikciós enzimes emésztés
|
|
Célgén szekvenálás
|
|
Magas expressziójú gazdaszervezetek szűrése
|
|
Genetikai stabilitással rendelkező gazdaszervezetek szűrése
|
|
Törzs megőrzése
|
Esettanulmány
Egy megfelelő gazdaszervezet 2.5-szeresére javítja a fehérje expressziós szintjét.
Megbíztak bennünket, hogy magas termelést fejlesszünk ki E. coli törzs. És háromféle reklámot próbáltunk ki E. coli a célfehérje jellemzői alapján. Kimutatták, hogy az S1-1 és S1-2 törzs (A. ábra: 1,2., 3.5. sáv) 3-szeresére javította a fehérjeszintet, mint a kliens kezdeti törzse (A. ábra: XNUMX. sáv).
Emellett az S1-1 törzs nagy genetikai stabilitást mutatott (B ábra), és az elsődleges sejtbanki (PCB) jelölt törzsként ismerték fel.
Szolgáltatási szolgáltatásaink
Bizonyított szakértelem különféle mikrobiális gazdákkal, pl. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink törzs 1/2/3/4; S.cerevisiae és a H. polymorpha.
Tapasztaltak vagyunk E. coli periplazmatikus szekréció, oldható és zárványtest expressziója, valamint élesztő intracelluláris vagy szekréciós expressziója. Nem adunk hozzá antibiotikumot, vagy a szabályozási útmutatás alapján adjuk hozzá az antibiotikumokat.
Létrehozunk egy nagy áteresztőképességű szűrési platformot a nagy termelésű és stabil törzsek szűrésére több mint száz jelölt törzsből.
A Good Data and Record Management keretében biztosított, hogy a törzs tervezési és szűrési folyamata nyomon követhető legyen.
HU
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
