Az N-glykan profilozása alapvető a biológiai gyógyszerek gyártásához. A Yaohai Bio-Pharma N-glykan profilozási szolgáltatást nyújt, amelyet Feketeanyag Cromatográfiás-Massza Spektrometriai (LC-MS) módszerrel végeznek el a felszabadított és címkézett glykánok esetében. Az N-glykan minta előkészítésének általános lépéseit a glycoproteinek (GP) felbontása, de-glikoziláció, tisztítás, címkézés/szervesítés, valamint a Szilárd Fázisú Extrakció (SPE) alkotja.
Részvettünk egyéb nagy molekulák fehérjei szerkezetének jellemzésében, beleértve a Rekombináns Alfejtény Oltásokat, Nan Testek/VHH-k/Egyszerűszerű Antitestek (sdAbs), Antitest Törések, Hormonok/Peptidok, Cytokinok, Növekedési Faktorok (GF), Enzymek, Kollagensek, stb.
Szabályozási követelmények az N-glykan profilozáshoz
Az ICH Q6B iránymutatás szerint „glykoproteineknél a szénhidrát-tartalom (neutrális cukrok, aminocukrok és sisziás savok) meghatározása történik. Továbbá a szénhidrát-láncok szerkezete, az oligoszacharid minta (antennaprofil), valamint a polipeptidlánc glykoszilációs helyei is elemzésre kerülnek a lehető legnagyobb mértékben.”
Elemzői módszer
| Elemzés |
Módszerek |
| N-glikán profilozás |
Felszabadított és címkézett glikánok folyadékkromatográfiás-massza spektrometriai (LC-MS) elemzése |
Eljárások
1. Enzimatikus glikánfelszabadítás Peptid N-Glicozidáz F (PNGase F) használatával
2. A felszabadított glikánok derivatizálása 2-aminobenzoamid (2-AB) használatával
3. A szerezett N-glikánok TSK Amide - 80 oszlopú tisztítása, ha nagy mennyiségű detergensen, nemvolatile sókban vagy ingyenes aminocsoportokkal rendelkező anyagokban van szó
4. Címkézés fluoreszkus 2-aminobenzoamiddal (2-AB)
5. Címkézett N-glikánok LC-MS elemzése
6. A székhely. Adatelemzés
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
