A Yaohai Bio-Pharma folyadékkromatográfiás tömegspektrometrián (LC-MS) vagy Edman-lebontási módszeren alapuló N-terminális szekvencia tesztelési és adatelemzési szolgáltatásokat kínál, amelyek lehetővé teszik az aminosavak meghatározását a kívánt fehérje megfelelő végpontjain. Az N-terminális módosítás LC-MS-sel is elemezhető.
Részt vettünk különböző nagy molekulák fehérjeszerkezeti jellemzésében, beleértve a rekombináns alegység vakcinákat, nanotesteket/VHH-kat/ egydoménes antitesteket (sdAb-okat), ellenanyag-fragmenseket, hormonokat/peptideket, citokineket, növekedési faktorokat (GF), enzimeket, stb.
Szabályozási követelmények az N terminálok sorrendjére vonatkozóan
Az ICH Q6B irányelvei szerint meg kell erősíteni a fehérje szekvenciáját, és meg kell vizsgálni a terminusokat az esetleges eltérések szempontjából.
N terminál szekvenálási módszerek
| Elemzés |
Módszer |
| N-terminális szekvenálás |
Edman-lebontás, folyadékkromatográfia-tömegspektrometria (LC-MS) |
Eljárások
LC-MS
1. Fehérje N-terminális fluoreszcens jelölése
2. Többszörös emésztés
3. LC-MS/tömegspektrometriás (MS) elemzés
Edman degradáció
1. A célfehérje nátrium-dodecil-szulfát (SDS) gélelektroforézise
2. Vigye át a gélt polivinilidén-fluorid (PVDF) membránokra és festse
3. Azonosítsa és vágja le a célfehérje sávot
4. N-terminális Edman szekvenálás
5. Adatelemzés
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
