Molekulatömeg-meghatározás LC-MS-sel
Az érintetlen molekulatömeget mindig is a biológiák egyik fontos jellemzőjének tartották. Az érintetlen molekulatömeg-elemzést a fehérje/peptid termékek kimutatására és a biológiai anyagok ellenőrzésére használják. A molekulatömeg mérése a szabályozási irányelvek előírása.
A Yaohai Bio-Pharma sértetlen molekulatömeg-elemzést kínál natív, redukált, N-deglikozilált körülmények között. Folyadékkromatográfiás tömegspektrometriát (LC-MS) alkalmazunk az ép molekulatömeg meghatározására.
A molekulatömegre vonatkozó szabályozási követelmények
Az ICH Q6-ban javasolt, hogy „a molekulatömeget (vagy méretet) méretkizárásos kromatográfiával, SDS-poliakrilamid gélelektroforézissel (redukáló és nem redukáló körülmények között), tömegspektrometriával (MS) és más megfelelő technikákkal határozzák meg”.
Analitikai módszerek
| Elemzés |
Mód |
| Molekuláris tömeg |
Natív, redukált, N-deglikozilált fehérjék vagy alegységek LC-MS/folyadékkromatográfiás/elektrospray tömegspektrometriája (LC/ES-MS) |
Analitikai eljárások
Ép molekulatömeg:
- LC-MS végrehajtása a beérkezett natív mintán.
- LC-MS Adatelemzés.
Csökkentett molekulatömeg:
- A fehérjeminta megfelelő redukálószerrel történő kezelése;
- LC-MS végrehajtása a redukált fehérjén;
- LC-MS Adatelemzés.
N-deglikozilált molekulatömeg:
- Az N-glikánok eltávolítása megfelelő enzimmel;
- LC-MS végrehajtása az N-deglikozilált fehérjén;
- LC-MS Adatelemzés.
Csökkentett és N-deglikozilált molekulatömeg:
- A fehérjeminta megfelelő redukálószerrel történő kezelése;
- Az N-glikánok eltávolítása megfelelő enzimmel;
- LC-MS végrehajtása redukált és N-deglikozilált fehérjén;
- LC-MS Adatelemzés.
Fehérje alegység molekulatömege:
- Alegység hasítás
- LC-MS végrehajtása fehérje alegységen
- LC-MS adatelemzés
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
