az mRNA széles körben használják a gén vagy fehérje funkciók tanulmányozásában. Ezenkívül gyakori a profilaxisos és terápiás biológiák fejlesztésében. Az RNA molekulák közös szintézis stratégiájaként az in vitro transzkripció (IVT) lehetővé teszi nekünk hatékonyan egyéni transzkripteket szerezni.
A Yaohai Bio-Pharma megalapozott egy sor mRNA szintézistechnológiát magas minőségű RNA előállítására, például sorrendtervezésre és optimalizálásra, IVT-re, tisztításra, lyofilizációra és lipidnanoparticula (LNP) befogásra. Minden termék szigorú minőségbiztosítási (QC) szabványok alapján engedélyezett.
A 2020-ban bekövetkezett COVID-19 pandémia miatt az mRNA technológia nagy lépésekkel fejlődött, és a hozzá kapcsolódó kutatások és alkalmazások előretörő fejlődést értek el, beleértve az infekciók megelőzésére szolgáló profilaktikus oltóanyagokat, az onkológiai terápiás oltóanyagokat és gyógyszereket, a tumorterápiát, a proteinzámító terápiát, a regeneratív orvostudományt és a sejt- és génterápiát (CGT).
mRNA oltóanyag | mRNA Gyógyszertermék |
|
A folyamat | Opcionális Szolgáltatás | Szolgáltatás részletei | Szállítási Idő (munkanap) | Átadandó Dokumentum |
mRNA Szerkezet Tervezése és Optimalizálása | Kódoló sorozatok tervezése és optimalizálása | CDS-sorozat tervezése és kódot optimalizálása | 1-3 | Szekvenčiós fájl |
Nem kódoló szekvensek tervezése és optimalizálása | UTR, polyA szekvensek tervezése és optimalizálása | |||
Transkripciói sablon plazmid előkészítése | Rekombináns plazmid előkészítése | Gén szintézis | 7-10 | |
Plazmid amplifikáció és extrakció | 4 | |||
Plazmid lineárisítása és tisztítása | ||||
mRNA in vitro transzkripció | Ko-transzkripciós fedés (egy lépéses módszer) | In vitro transkripció (IVT) / Kap analóg | 1-2 | N/A |
Nukleotid módosítások (UTP/CTP módosítások) | ||||
DNA-sablon eltávolítása (DNase I) | ||||
Enzimatikus fedetelés (kétlépéses folyamat) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotid módosítások (UTP/CTP módosítások) | ||||
DNA-sablon eltávolítása (DNase I) | ||||
mRNA tisztítás (lithium-klorid / ferromágneses gőzök) | ||||
Enzimatikus fedetelés | ||||
mRNA szivárgatása | Konvencionális tisztítási eljárás | Lithium-klorid precipitáció | 1 | mRNA gyógyszeri anyag |
Ferromágneses gőz tisztítás | ||||
Kromatográfiai oszlop tisztítási sémája | Több kromatográfiai módszer kombinálása | 1-2 | ||
Puffercseré Friedmann | Ultrafiltráció | 1 | ||
mRNA lyofilizálása | Liofilizálás | Előre az első hűtés | 2-3 | mRNA liofilizált por |
Elsőszámú szárítás (sublimáció) | ||||
Második szárítás (deszorció) | ||||
mRNA befésülése | LNP befészles | LNP befészles | 2-3 | mRNA-LNP gyógyszeri termék |
Konzentráció és búfercseréje | ||||
mRNA minőségvizsgálat | mRNA gyógyszervanyag / lyofilizált por | Konzentráció, szűzseg | 1 | Tesztjelentés |
Integritás, fedettségi hatékonyság, polyA ív eloszlása | 2-5 | |||
mRNA-LNP gyógyszeri termék | Bezáró hatékonyság | 1 | ||
Részecskeméret és eloszlás | ||||
Felszíni töltettség | ||||
mRNA kifejezés érvényesítése | 293T sejtelemzés | Sejtáblázás | 4 | |
Átmeneti sejtek transzfekciója | ||||
Fluoreszcencia jelek megfigyelése | 1-3 | |||
Western bolt (WB) / Enzym-húzott immunosszayg (ELISA) |
5' Kap |
▪ Nincs kap ▪ Cap0, közös-kap ▪ Kap1, közös kapcsolás ▪ Kap1, enzimatikus fedet |
5’ UTR/3’ UTR |
▪ Természetes UTR sorozat ▪ Mutáns/Szerkezeti UTR sorozat |
3' PolyA szíf |
▪ 100A ~120A szíf (ajánlott) ▪ Szegmentált polyA szíf ▪ Egyéb testreszabott szífok |
Módosított nukleozidák |
▪ Módosítatlan alapok ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Methilpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-methilcitosin (m5C) ▪ 5-methiluridin (m5U) ▪ 5-methoxiuridin (5moU) ▪ 2-tióuridin (s2U) ▪ 2′-O-methil-U ▪ Egyéb módosítások |
Integrált szolgáltatási folyamat
Sorozatosszolgáltatásokat nyújtunk az eleji sorrendtervezéstől az utáni mRNA-felkészítés, minőségbiztosítás és kifejezési érvényesítésig.
Nemzetközi szintű sorrendtervezés és optimalizálás
Szakértői mRNA-sorrendtervezés és -optimalizálás hatékonyabb mRNA-kifejezéshez.
Diverzifikált nukleotid módosítások
Hatékonyan növelik az mRNA-kifejezést és csökkentik az mRNA rossz immunválaszt.
Teljesített tömegtisztítási platform
Egy konvencionális és önfejlesztett tisztítási módszer kombinálásával magas tisztaságú mRNA-mintákat kapunk.
Teljes minőségbiztosítási platform
Bogatos minőségbiztosítási lehetőségek a routin tesztek igényeinek megfelelően, például koncentráció, A260/280 tisztaság és integritás, valamint magas minőségbiztosítási követelményeknek, például kalapcsomóefficienciának/polyA eloszlásnak.
Gyors szállítás
Az egyéni mRNA-hármas 7 napon belül érkezhet, kivéve az külső sorrendszintézist.