Az in vitro transzkripciós (IVT) mRNS előállítási folyamatában linearizált plazmid DNS szükséges az IVT transzkripciós templátjaként a T7 RNS polimeráz segítségével. A jó minőségű plazmid DNS kulcsfontosságú az in vitro transzkripcióhoz.
Az érett plazmid-előkészítési szolgáltatási platformon alapuló Yaohai Bio-Pharma nagy tisztaságú és magas színvonalú linearizált plazmid DNS-előkészítési szolgáltatást kínál a hatékony IVT transzkripció elérése érdekében.
Szolgáltatások részletei
| folyamat | Választható szolgáltatás | Szolgáltatás részletei | Szállítási időszak (munkanap) |
| Cirkuláris plazmid készítés | Génszintézis | Génszintézis (harmadik fél) | 7-10 |
| Plazmid amplifikáció | Plazmid amplifikáció | 2 |
| Plazmid extrakció |
| Linearizált plazmid készítés | Plazmid linearizálás és tisztítás | Plazmid linearizáció | 1 |
| Linearizációs DNS tisztítás |
| Plazmid DNS minőségellenőrzés | Koncentráció tisztasága | Ultraibolya (UV) spektrofotometria | 1-2 |
| Plazmid konformáció | Agaróz gél elektroforézis (AGE) |
| Kapilláris elektroforézis (CE) - opcionális |
| A plazmid azonosítása | Restrikciós enzim azonosítása/ AGE |
Jellemzők
- Szabadon vágott sablon plazmid
Linearizálási módszerek rugalmas kiválasztása
- Magas helyreállítási arány
A DNS extrakciós és tisztítási módszerek optimalizálása a magas visszanyerési arány elérése érdekében.
- Szigorú minőség-ellenőrzés
Szigorú folyamatszabályozási szabványok, a plazmidminták szuperhelikális konformációs rátája a kutatáshoz több mint 80%.
Magas színvonalú és nagy hatékonyságú plazmid előkészítési és minőségellenőrzési szolgáltatások a kísérleti igények kielégítésére.
Esettanulmány
A Yaohai Bio-Pharma katalógusában szereplő mRNS_luciferáz termék példájaként a transzkripciós templát plazmidminta (kutatási fokozat) szuperhelikális aránya több mint 90%, linearizációs aránya közel 100%, az ezt követő transzkripciós arány pedig akár 1:200 ( linearizált plazmid DNS:mRNS).
A linearizált plazmid templátként történő előállításával nyert mRNS_luciferázt 293T-sejtekbe transzfektáljuk, és az enzim-szubsztrát reakcióaktivitást 24 órával a transzfekció után értékeljük.
Nyilvánvalóan erős luciferáz aktivitási szignál kimutatható, azaz a luciferáz fehérje hatékonyan expresszálódik, ami arra utal, hogy a transzkripciós templát tisztasága teljes mértékben kielégíti a jó minőségű mRNS előállítás követelményét.
Supercoiled plazmidarány vizsgálat
A luciferáz mRNS expressziójának validálása in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
