Az in vitro transzkripció (IVT) mRNA előkészítési folyamatában lineáris plazmid-DNA szükséges transzkripciói sablonként az IVT-hez a T7 RNA polymeráz segítségével. A minőségi plazmid-DNA döntő jelentőségű az in vitro transzkripció szempontjából.
A fejlett plazmid-előkészítési szolgáltatási platform alapján a Yaohai Bio-Pharma magas szintű és tisztusságú lineáris plazmid-DNA előkészítési szolgáltatást kínál hatékony IVT transzkripció érdekében.
A folyamat | Opcionális Szolgáltatás | Szolgáltatás részletei | Szállítási Idő (munkanap) |
Körképző plazmid előkészítése | Gén szintézis | Gén szintézis (Harmadik féltől) | 7-10 |
Plazmid amplifikáció | Plazmid amplifikáció | 2 | |
Plazmid kivonás | |||
Lineáris plazmid előkészítése | Plazmid lineárisítása és tisztítása | Plazmid lineárisítása | 1 |
DNA lineárisítás tisztítása | |||
Plazmid DNS minőségi ellenőrzés | Koncentráció szűzseg | Ultraviolett (UV) spektrofotometria | 1-2 |
Plazmid konformáció | Agarozagélszelektrófózis (AGE) | ||
Kapilláris elektroforézis (CE) - Opció | |||
Plazmid azonosítás | Megkötő enzim azonosítás / AGE |
Lineárisítási módszerek rugalmas kiválasztása
A DNS kivonási és tisztítási módszerek optimalizálása a magas visszaállítási arány eléréséhez.
Szigorú folyamatvezérlési szabványok, több mint 80%-os szuperhelyikális konformációs arány plazmidminták kutatási célból.
Magas szintű és hatékony plazmid előkészítési és minőségbiztosítási szolgáltatások kísérleti igényeknek való megfelelés érdekében.
A Yaohai Bio-Pharma katalógus mRNA_luciferase termékét figyelembe véve, a tranzkripciói sablonplazmidmintának (kutatási szint) több mint 90%-os szuperhelyikális aránya van, majdnem 100%-os lineáris arány, és a következő tranzkripció aránya 1:200 (lineáris plazmid DNS:mRNA).
Az mRNA_luciferase, amely lineáris plazmid sablonként készült, transzfektálva lett 293T sejtökbe, és az enzim-substrátum reakció aktívítása értékelésre kerül 24 óra után a transzfekció után.
Egy nyilvánvalóan erős luciferáz tevékenységi jelet lehet észlelni, azaz a luciferáz fehérje hatékonyan kifejlődik, amely azt mutatja, hogy a transkripciói sablon tisztasága teljesen kielégíti a magas minőségű mRNA előkészítés követelményeit.
Szuperkarikált plazmid arányvizsgálat
Luciferáz mRNA kifejezés in vitro ellenőrzése