A központi dogma szerint a hírvivő RNS (mRNS) a híd a genetikai anyag DNS-ből a fehérjék felé történő átviteléhez.
Az mRNS biológiai szerepet játszik azáltal, hogy in vivo fehérjéket kódol, és az eukarióta szervezetekben az érett mRNS öt komponensből áll: 5' Cap (cap szerkezet), 5' UTR (nem kódoló régió), ORF (nyílt leolvasási keret), 3ʹ UTR. és 3' polyA farok (poliadenilát farok).
Szolgáltatások részletei
| folyamat | Választható szolgáltatás | Szolgáltatás részletei | Szállítási időszak (nap) |
| mRNS szekvencia tervezés és optimalizálás | Kódoló szekvenciák tervezése és optimalizálása | CDS szekvencia igazítás CDS kodon optimalizálás | 1 |
| Nem kódoló szekvenciák tervezése és optimalizálása | 5' UTR szekvencia tervezés és optimalizálás 3' UTR szekvencia tervezés és optimalizálás polyA szekvencia tervezés és optimalizálás | 1-2 |
Testreszabható lehetőségek
| 5' UTR/3' UTR | - Természet UTR szekvencia
- Mutáns/Műszaki UTR szekvencia
|
| 3' PolyA Tail | - 100A ~ 120A farok (ajánlott)
- Szegmentált polyA farok
- Egyéb Egyedi farok
|
Az mRNS szekvenciatervezés közös stratégiái
| mRNS komponensek | Biológiai funkciók | Optimalizálási stratégiák |
| 5' Kap | Védje meg az mRNS-t az exonukleázok általi lebontástól, és a 3'-végen lévő poliA-farokkal, a poliA-kötő fehérjével és a transzlációs iniciációs faktor fehérjével összhangban működjön a fehérje transzlációjának elindítása érdekében. | A természetes Cap1 szerkezet elkerüli a mintázatfelismerő receptorokat, és így csökkenti a természetes immunválaszt, ami egylépéses ko-transzkripciós vagy kétlépcsős enzimatikus capping-el érhető el [a részletekért lásd az mRNS enzimatikus capping és co-transscription capping című részt]. |
| 5' UTR | Az 5' UTR riboszómák által felismerhető, szabályozza az mRNS transzlációját és befolyásolja az mRNS stabilitását. | Tartalmazzon Kozak szekvenciákat nagyon stabil másodlagos szerkezet nélkül. Az in vitro transzkripciós (IVT) mRNS-ek, például az α-globin és a β-globin esetében előnyösek az erősen expresszált gének természetes UTR-ei. |
| CDS | Fehérjekódoló régiók és antigének, antitestek vagy más funkcionális fehérjék kódoló szekvenciái. | A kodonoptimalizálás növeli a transzláció szintjét, megjegyezve, hogy bizonyos nem optimális kodonok szerepet játszhatnak a fehérje feltekeredésében. |
| 3' UTR | Szabályozza az mRNS transzlációját és stabilitását. | Az IVT mRNS-ek, például az α-globin és a β-globin esetében előnyösek az erősen expresszált gének természetes UTR-ei. |
| 3' polyA farok | Szabályozza a fehérje expresszióját és védi a kupak szerkezetét a lebomlástól. | Megfelelő hosszúság (100-150 bp) szükséges; A transzkripciós templát plazmidon a poliA farok részlete pontosabb poliA farokhosszt biztosít. |
Jellemzők
- Változatos UTR-forrás kiválasztása
Erősen kifejezett természetes és módosított UTR könyvtárak több forrása; kiforrott UTR módosítási stratégia;
- Élvonalbeli CDS-optimalizáló csapat
Együttműködjön egy professzionális mesterséges intelligencia-algoritmus csapattal a kodonok optimalizálásának befejezéséhez.
- Egyenletes polyA farokelosztás
Adjon hozzá poliA szekvenciákat a DNS-templátoknak megfelelően az mRNS hosszának pontosabb szabályozásához.
- Változatos optimalizálási kombinációk
Hatékony mRNS expresszió elérése alacsony immunogenitással.
Esettanulmány
Kettős riporter mRNS szekvenciatervezése: mCherry-eGFP mRNS
A Yaohai Bio-Pharma mRNS-szolgáltatását továbbra is továbbfejlesztik egy kettős riportergén tandemszekvencia tervezésével és optimalizálásával, amely kettős gének együttes expresszióját éri el.
Hagyományos transzfekciós reagens segítségével a kettős gén tandemszekvenciájú mCherry-eGFP mRNS-t 293T sejtekbe transzfektálják, és két fluoreszcens jelet (mCherry (piros)) és fokozott zöld fluoreszcens fehérjét (eGFP) detektálunk egyidejű expresszióval 48 óra elteltével, és a halmozott grafikon sárga színnel van kiemelve.
Az mCherry-eGFP mRNS expressziója 293T sejtben
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
