Az mRNS Potencia Assay jelentősége
Az mRNS-vakcinák és terápiák rohamos fejlődésével egy speciális analitikai módszercsoportra van szükség az mRNS hatékonyságának (a biológiai aktivitásuk meghatározására) tesztelésére, beleértve az mRNS transzlációs hatékonyságát. Ezek a módszerek jellemzően sejttranszfekción és a célfehérje funkcionális vizsgálatán alapulnak.
A Yaohai Bio-Pharma sejtalapú hatásvizsgálatokat kínál mRNS gyógyszeranyagok vagy LNP-termékek mérésére, beleértve a sejttranszfekciót (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 sejtek stb.) és ELISA vagy Western Blotting (WB) vizsgálatokat.
Hatékonysági vizsgálatokra vonatkozó szabályozási követelmények
A WHO szabályozási megfontolásai szerint „A végső vakcina minden egyes tételének hatásosságát megfelelően kvantitatív és validált funkcionális módszer(ek) segítségével kell meghatározni. A lehetséges in vitro hatásvizsgálatok magukban foglalhatják a sejtalapú transzfekciós rendszereket vagy a sejtmentes vizsgálatokat. Az USP pedig egy „sejtalapú vizsgálatot” javasolt az mRNS hatékonyságának, azaz a célfehérje expressziójának tesztelésére.
Eljárás
1. lépés Sejtalapú transzfekció mRNS-sel vagy mRNS-LNP-vel
A sejteket tenyésztjük és mRNS-sel vagy mRNS-LNP-vel transzfektáljuk. Részletesebben, az mRNS transzfektálása a transzfekciós reagenssel való összekeverés után történik, míg az mRNS-LNP közvetlenül a sejtekbe transzfektálódik. 24-48 óra elteltével centrifugálással tisztítsuk meg az expresszált fehérjét tartalmazó felülúszót.
2. lépés: A célfehérje funkcionális vizsgálatai
Végezzen ELISA vagy WB vizsgálatokat a célfehérjék funkcionális kötődésének értékelésére.
Esettanulmány
Az mRNS-minták sejtalapú hatékonysági vizsgálatai
A Yaohai-BioPharma sejtalapú potenciavizsgálati módszert fejlesztett ki mRNS-hez, amely sejtkultúrát, sejttranszfekciót és fehérje funkcionális vizsgálatokat foglal magában. 293T sejtekbe eGFP mRNS-t, mCherry mRNS-t, luciferáz mRNS-t, spike protein mRNS-t transzfektáltunk, és fluoreszcenciával, lumineszcens vagy színes jellel, WB-vel, ELISA-val detektáltuk a célfehérjét.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEM
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
