Minden kategória
Downstream folyamatfejlesztés

Downstream folyamatfejlesztés

Főoldal >  Mikrobiális CDMO  >  Fejlesztés  >  Downstream folyamatfejlesztés

Downstream folyamatfejlesztés

A Downstream Process (DSP) fejlesztésének jelentősége

A teljes fermentlé tartalmazza a célfehérjét vagy plazmidot, valamint a termékkel és folyamattal kapcsolatos szennyeződéseket, pl. aggregátumokat, mikrobiális sejtszubsztrátokat, gazdasejt fehérjéket (HCP), gazdasejt DNS-t (HCD), endotoxint és antibiotikumokat.

Ezért kulcsfontosságú egy hatékony DSP, tisztítási eljárás megtervezése bizonyos szennyeződések eltávolítására, valamint nagy tisztaságú és kiváló minőségű gyógyszerkészítmények előállítására. Ezenkívül a tisztítási folyamat optimalizálása hozzájárulhat a termék visszanyerésének növeléséhez, a költségek csökkentéséhez, valamint a folyamat skálázhatóságának és reprodukálhatóságának javításához.

Kulcsszavak: folyamatfejlesztés, optimalizálás és validálás, tisztítási folyamat, kromatográfia, szennyeződések eltávolítása, HCP eltávolítás, HCD elimináció, endotoxin eltávolítás, fehérje denaturáció és újratekeredés, VLP összeállítás, konjugáció

Alkalmazás: Biogyógyszeripar, humán gyógyászat, állatgyógyászat, vakcina, rekombináns nagy molekulájú biológiai szerek, rekombináns biológiai szerek, biológiai reagens

A Yaohai Bio-Pharma DSP megoldásai

Nagy tapasztalattal rendelkezünk a célfehérjék vagy plazmidok komplex mátrixokból történő izolálásában a downstream tisztítási folyamat fejlesztésével és optimalizálásával. A biológiai anyagok tisztítására különböző egységműveletek alkalmasak, beleértve a centrifugálást, szűrést, homogenizálást, lúgos lízist, ultraszűrést, kicsapást, fehérjedenaturálást és újratekercselést, kromatográfiát stb.

Elérhető tisztítási fejlesztési szolgáltatásaink a következők:
  • A teljes tisztítási folyamat fejlesztése a sejt vagy a felülúszó gyűjtésétől a végső hatóanyagig.
  • A tisztítási folyamat optimalizálása termék- és folyamatfüggő szennyeződések alapján a termék minőségének és biztonságának növelése érdekében, pl. HCP, HCD, endotoxin.
  • Kulcsparaméterek meghatározása és optimalizálása egy vagy több egységműveletben, ideértve a sejtlízist, a tangenciális áramlási szűrést, a gyantaszűrőt, a kromatográfiát, a fehérjedenaturálást és az újratekergetést stb.
  • A folyamat optimalizálása a minőség, a hozam, a visszanyerés, a költségek és a méretezhetőség szempontjából.
  • A downstream tisztítási folyamat validálása.
  • Kockázatalapú paraméter-tartomány értékelése és Kísérletek tervezése (DoE) a folyamatmodellezésben.
Szolgáltatás részletei

A standardizált fehérje- vagy plazmid-tisztító platformok több nyers tisztítási lépésen és 4-nél kevesebb kromatográfiás lépésen alapulnak, beleértve a befogást, a közbenső tisztítást és a polírozást.

Szolgáltatás részletei Az egység műveletei paraméterek
Nyers tisztítás centrifugálás Forgási sebesség, idő
Nagynyomású homogenizálás Teljes szilárdanyag-tartalom, nyomás, ciklusok
Folyamatos lúgos lízis Az újraszuszpendált sejtek aránya a lízisoldathoz viszonyítva, a lízis ideje
Tangenciális áramlási szűrés A membrán anyaga és pórusmérete, a betáplálási sebesség transzmembránnyomás (TMP), a szűrőtérfogat és a membrán terület aránya
Csapadék A csapadék típusa és koncentrációja, adalékanyag, pH, hőmérséklet, idő
Denaturáció és újrahajtogatás A zárványtest fehérje szolubilizálása Denaturálószer-koncentráció (pl. karbamid, guanidin-HCl, erős ionos mosószer), mosószerek (pl. nátrium-dodecil-szulfát, SDS), redukálószerek (pl. ditiotreitol, DTT), kelátképző szerek (etilén-diamin-tetraecetsav, EDTA), hőmérséklet, idő
Fehérje újrahajtogatás Újrahajtogatási módszerek (hígítás, dialízis vagy SEC újrahajtogatás), fehérjekoncentrációk, pufferek, pH, hőmérséklet, idő, oxidáló és redukáló szerek (pl. glutation, GSH/oxidált glutation, GSSH, DTT/GSSH, cisztein/cisztin adalékok), kisméretű moleculedadalékok (L-arginin, karbamid, guanidin/HCl és mosószerek)
Rögzítés, közbenső tisztítás és polírozás AC (affinitáskromatográfia) Többféle kromatográfiás gyanta/oszlop (pl. AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), oszlophossz és átmérő, puffer összetétel, injektálási térfogat, mozgófázis összetétel (adszorpció és deszorpció), pH, áramlási sebesség, kötés, Mosási és elúciós körülmények.
IEX (anion- vagy kationcserélő kromatográfia)
HIC (hidrofób interakciós kromatográfia)
Sótalanító és/vagy méretkizárásos kromatográfia (SEC)
RPC (fordított fázisú kromatográfia)
MMC, kevert módú kromatográfia
Esettanulmány

Case 1

Megbízatást kaptunk a downstream tisztítási folyamat fejlesztésére és optimalizálására, hogy a fehérje tisztaságát 85%-ról 90%-ra növeljük, miközben csökkentjük a kromatográfiás lépések számát.

A Yaohai robusztus és méretezhető tisztítási eljárást biztosított 3 lépésből álló kromatográfiával a célfehérje, egy bakteriális allergia esetében. És a végső tisztaság elérte a 95%-ot.

图片

Case 2

Ügyfelünk Yaohait jelölte ki a vírusszerű részecske (VLP) vakcina endotoxin eltávolítási folyamatának optimalizálására.

Munkacsoportunk kromatográfiás paraméterek optimalizálását végezte, és 98%-os tisztaságú, 12.8EU/mg endotoxin maradékanyagot tartalmazó gyógyszert állítottunk elő.

图片

Tapasztalataink
  • Részt vettünk különböző nagy molekulák fejlesztésében és gyártásában, beleértve a rekombináns alegység vakcinákat, VLP-ket, hormonokat (inzulin, GLP-1, növekedési hormon), citokinek (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21) ), növekedési faktorok (EGF, FGF, NGF), nanotestek/egydoménes antitestek (sdAb), enzimek stb.
Felszerelés

Az iparágban vezető AKTA Pure, AKTA Avant és Preparative HPLC rendszereket használunk különféle kromatográfiás eljárások végrehajtására, beleértve az affinitást, ioncserét, hidrofób kölcsönhatást, fordított fázisú és méretkizárásos kromatográfiát.

图片 图片 图片

Kap egy ingyenes idézet

Vegye fel velünk a kapcsolatot!