A glutamin és az asparagin oldals láncok deamidációja gyakori módosítás a fehérjékből készült biogalénerek tulajdonságaira gyakorolt hatás szempontjából. A deamidáció előfordulhat glutamin maradékokban, ám általában sokkal alacsonyabb sebességgel. A deamidáció sebességét a hőmérséklet, a pH, a helyi fehérjestruktúra és az oldószomszédos aminosavmaradékok befolyásolják.
A Yaohai BioPharma deamidációs tesztelési szolgáltatást kínál, amely lehetővé teszi az aminosav-deamidáció érzékelését folyadékromatográfia-massza spektrummetri (LC-MS) segítségével.
Részt vettünk különböző nagy molekulák fehérjestrukturális jellemzésében, beleértve a Recombinant Subunit Olgoványokat, Nan-testek/VHH-k/Egy tartományú testek (sdAbs), Testreszeti Fragments, Hormonok/Péptidök, Cytokinok, Növekedési Faktorok (CF), Enzymek, Kollagenek stb.
Szabályozási követelmények az aminosav-deamidációra vonatkozóan
Az ICH Q6B iránymutatások szerint a deamidált formákat kromatográfiás, elektroforétikus és/vagy más releváns analitikai módszerekkel lehet észlelni és jellemzni.
Elemző módszerek
| Elemzés |
Módszerek |
| Deamidáció |
Folyadékkromatográfia-Massza-spektrometria (LC-MS) |
Eljárások
pl., asztokin deamidáció
1. Enzimatikus felosztás
2. LC-MS a magas teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) feltételei alatt
3. Adatanalízis
Az asparagin deamidáció egy succinimid-közegyén (Suc) áthaladó úton zajlik, amely ráceklódásra és hidrolizисre érzékeny, négy Asp izomerrel számolva, beleértve az L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp és D-IsoAsp.
Elméletileg a glutamin deamidáció négy megfelelő glutamin izomert vehet gyártani egy olyan folyamaton keresztül, amely hasonló az asparagin deamidációhoz.
A nagy felbontású tömegspektrometria könnyen azonosítja az 1-Da tömegkülönbséget az Asn/Gln-tartalmazó peptidök és azok megfelelő deaminált partnerei, az Asp/Glu között.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
