Az N-glikozilációs hely elemzése döntő fontosságú a glikánok funkcióinak megértéséhez. A Yaohai Bio-Pharma folyadékkromatográfiás tömegspektrometriát (LC-MS) használ az N-glikozilációs hely enzimes hasítása után.
Részt vettünk különböző nagy molekulák fehérjeszerkezeti jellemzésében, beleértve a rekombináns alegység vakcinákat, nanotesteket/VHH-kat/ egydoménes antitesteket (sdAb-okat), ellenanyag-fragmenseket, hormonokat/peptideket, citokineket, növekedési faktorokat (GF), enzimeket, stb.
Az N-glikozilációs hely szabályozási követelményei
Az ICH Q6B irányelve szerint „glikoproteinek esetében a szénhidráttartalmat (semleges cukrok, aminocukrok és sziálsavak) határozzák meg. Továbbá a lehető legjobban elemzik a szénhidrátláncok szerkezetét, az oligoszacharid mintázatot (antennáris profil) és a polipeptidlánc glikozilációs helye(i)t.
Analitikai módszer
Elemzés |
Mód |
N-glikozilációs hely |
Folyadékkromatográfia-tömegspektrometria (LC-MS) enzimatikus hasítás után |
Eljárások
1. A fehérje enzimes emésztése tripszin vagy más proteáz segítségével
2. Külön fragmens glikopeptidek
3. Erősítse meg az N-glikozilációs helyet LC-MS-sel
4. Adatok elemzése