Az N-glykoszilációs hely elemzése alapvető a glikánok funkcióinak megértéséhez. A Yaohai Bio-Pharma enzymes levágás után használ Liquid Kromatográfiát-Massza Spektrometriát (LC-MS) az N-glykoszilációs helyre.
Részvettünk egyéb nagy molekulák fehérjei szerkezetének jellemzésében, beleértve a Rekombináns Alfejtény Oltásokat, Nan Testek/VHH-k/Egyszerűszerű Antitestek (sdAbs), Antitest Törések, Hormonok/Peptidok, Cytokinok, Növekedési Faktorok (GF), Enzymek, Kollagensek, stb.
Szabályozási követelmények az N-glykoszilációs helyre vonatkozóan
Az ICH Q6B irányelv szerint „a glükoproteineknél meghatározzuk a szénhidrát tartalmát (növényi szénhidrátok, aminoszénhidrátok és sialinsavok). Továbbá a szénhidrát-láncok szerkezetét, az oligoszacharid mintázatot (antennaprofilját) és a polipeptidlánc glykoszilációs hely(ét) elemzik a lehető legnagyobb mértékben.”
Elemzői módszer
Elemzés |
Módszerek |
N-glikozilációs hely |
Folyadék kromatográfia-massz-spektrometria (LC-MS) enzimátos felosztás után |
Eljárások
1. Enzimes felbontás a trypsinnel vagy más proteázissel
2. Szétválasztja a fragmentumokat glycopeptidékként
3. Erősítse meg az N-glikozilációs helyet LC-MS-sel
4. Adatküldés elemzése