A vitro ciklizálással és az RNase R gazdagítással kapott termékek további tisztításra szorulnak a vitro transkripcióból (IVT), beleértve a ciklizálási reakcióban nem felhasznált anyagokat, a reakciós melléktermékeket és a törött RNA-t.
A Yaohai Bio-Pharma érett LiCl sedimentációs, magnes műtrágya tisztítási, önfejlesztett tisztítási és másféle tisztítási megoldásokkal rendelkezik, amelyek hatékonyan eltávolítják a különböző szennyezőanyagokat és nagyon tiszta circRNA-t készítenek.
Tisztítási megoldás kis mennyiségű circRNA-ra sejttranszfekcióra és részeként állati kísérletekre.
Tisztítási megoldás kis mennyiségű circRNA-hoz sejttranszfekcióra és állati kísérletek részeként.
Minőségesebb alkalmazási esetek;
Stabil és skálázható tisztítási folyamat GMP gyártási követelményeknek való megfeleléséhez.
A folyamat | Opcionális Szolgáltatás | Szolgáltatás részletei | Szállítási idő (Nap) | Átadandó Eredmények |
circRNA tisztítás | Konvencionális megjósolási megoldás | Lithium-klorid precipitáció | 1 | circRNA aktív anyag |
Ferromágneses gőz tisztítás | ||||
Magas fokú circRNA szűrőzés | Készítményes magas teljesítményű folyadékromatográfia (HPLC) | 1-2 | ||
Puffercseré Friedmann | Ultrafiltráció | 1 | ||
circRNA minőségbiztosítás | Konzentrálás / tisztítás | Ultraviolett (UV) spektrofotometria | 0.5 | Tesztjelentés |
Tisztaság | Agarozagélszétválasztó elektroforézis (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - opció | 1 |
Alkalmazási forgatókönyvek megvalósíthatók.
tiszta circRNA-t 90%-nál több százalékban;
A kísérleti környezet és az egyédszerelvényekben lévő RNázok szigorú ellenőrzésével hatékonyan elkerülhető az RNA degradáció.
A Yaohai Bio-Pharma kidolgozott egy érett circRNA tisztítási megoldást, amely hatékonyan eltávolíthatja a folyamatokhoz kapcsolódó szennyező anyagokat.
Az általános megoldás által tisztított cirkuláris RNA termékekben még mindig nyilvánvalóan keverednek a törött RNA-k és intronok.
A Yaohai Bio-Pharma által fejlesztett tisztítási megoldás után sikerült eltávolítani a különböző lineáris RNA-szennyezőanyagokat, például a törött RNA-kat és intronokat.
circRNA kifejezés érvényesítése
Egy konvencionális liposzómával a tisztított eGFP circRNA 293T sejtekbe transzformálva, és 24 óra múlva megfigyelhető fluoreszcencia jelet, amely 48 óráig folyamatosan növekszik. A fluoreszcencia jele még a transfekció utáni hetedik és tizenegyedik napon is észlelhető.