A befésülés alapja a képződményrendszer tervezése és fejlesztése. Jól tervezett képződményrendszer lehetővé teszi a circRNA molekulák testbeli belépését, anélkül, hogy RNA-enzimek által bontanák, majd hatékonyan kézbesítenék az útmutató helyre, átkelne a sejtmembránon, és intracellulárisan felszabadulna.
A lipid nanoparticula (LNPs) a legjobb elérhető szállítási rendszer, amely előnyöket kínál zárkózásban, élőlénybeli kifejezésben és élőlénybeli biztonságban más szállítási rendszerekhez képest. A nukleinsav-fragmentumokkal ellátott LNPs könnyen felvethetők a sejtökbe, és intraceluláris testeket alkotnak. Amint a sejtbe kerülnek, az intraceluláris test savos környezete protonálja és pozitívan tölti az ionizált zsírfejét, így összeolvad a test belső membránjával és felszabadítja a célnukleinsavt a sejt működésére.
A Yaohai Bio-Pharma circRNA szolgáltatása folyamatosan fejlődik és circRNA-LNP zárkózást szolgáltathat, amely optimalizálja a kapcsolódó kritikus folyamatparamétereket, és javítja a circRNA gyógyszer termelésének konzisztenciáját és reproduktivitását.
A folyamat | Szolgáltatás részletei | Szállítási idő (Nap) | Átadandó Eredmények |
circRNA-LNP befogadás | Anyag és folyadék előkészítése | 2 | circRNA-LNP gyógyszervarázslat (DP) |
Mikrofluidikai eszköz keverése | |||
Tangenciális folyamatú szűrődés | 1 | ||
Sterilizáló szűrő | |||
circRNA-LNP minőségi ellenőrzés | Bezáró hatékonyság | 1 | Tesztjelentés |
Részecskeméret és Polidispersitási index | |||
Zéta-potenciál |
Gyors szintézis, magas kutatási és fejlesztési hatékonyság valamint előre optimalizált megoldások;
A bezárós arány több mint 90%-ra elérhető;
A lipidnanocsempészek mérete kontrollálható a folyadék behajítási sebességének és arányának változtatásával;
a circRNA-LNP termékek in vitro sejtbeli kifejezés által ellenőrizve, és képesek hatékonyan kifejezni a célpontos bírtokát.
LNP-eGFP circRNA minták előkészítése történt, és azok különböző dozisek (1ug, 2ug és 4ug) közvetlenül transfektálva lettek 293T segekbe annak ellenőrzésére, hogy képesek-e kifejezni a célproteint. A transfekció után 48 órában világos fluoreszcens jelet lehet megfigyelni, és van fluorescence intenzitásának dozisküldő hatása.
A Lipo-circ_eGFP, amely liposzómából és nem becsomagolt eGFP circRNA-ból áll, vezérlőként szolgál.