A törzsszűrés jelentősége
A biológiai CMC fejlesztéshez szükséges a megfelelő gazdaszervezetek szűrése, amely meghatározza a termék és a gyártási folyamat minőségét és konzisztenciáját. A gazdaszűrés közvetlen célja egy olyan jelölt elsődleges sejtbank (PCB) biztosítása, amely magas expressziós szintekkel és nagy stabilitással rendelkezik mind az átoltás, mind a tárolási stabilitás tekintetében. A megfelelő gazdaszervezet szűrésére két fő okból van szükség:
- Először is a magas expressziós szinttel rendelkező mikrobiális gazdaszervezet kiválasztása. Számos kereskedelmi forgalomban kapható törzs létezik, amelyeket különböző típusú fehérjék, például toxikus fehérjék, oldható fehérjék vagy eukarióta fehérjék expresszálására használnak.
- Másodszor a gazdaszervezet genetikai stabilitással történő szűrése. A genetikai stabilitás vizsgálata kulcsfontosságú pont a gyártási életciklus során. Feltételezhető, hogy a magas genetikai stabilitást a megfelelő törzs másik kulcsfontosságú jellemzőjeként ismerik el.
Kulcsszavak: mikrobatörzs szelekció, mikrobiális törzsszűrés, baktériumok vagy élesztőgombák nagy áteresztőképességű szűrése, nagy termelésű törzsszűrés, nagyon stabil törzsszűrés, genetikailag stabil törzsszűrés Alkalmazás: humán gyógyászat, állatgyógyászat, vakcina, szintetikus biológia, rekombináns nagymolekula biológiai anyagok, biológiai reagens
A Yaohai Bio-Pharma törzsszűrési szolgáltatásai
Több mint 10 éves CDMO-tapasztalattal a mikrobiológia területén, támogatjuk különböző nagy molekulák fejlesztését és gyártását, beleértve a rekombináns alegység vakcinákat, vírusszerű részecskéket (VLP), hormonokat (inzulin, GLP-1, növekedési hormon), citokineket ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), növekedési faktorok (EGF, FGF, NGF), nanotestek/egydoménes antitestek (sdAb), enzimek stb.
Gazdag tapasztalattal rendelkezünk a különböző típusú plazmid vektorok és mikrobiális gazdák kiválasztásában, beleértve a baktériumokat is. Escherichia coli (E. coli), és élesztőt Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Megtaláljuk a legjobb expressziós rendszert az Ön egyedi biológiájához.
Különféle mikrobiális gazdákat gyűjtöttünk tiszta forrásokkal és szabványos CoA-val, beleértve E.coli kifejezés és élesztő kifejezés.
Szolgáltatás részletei
Szolgáltatások
|
Szolgáltatás részletei
|
Minimális idővonal/nap
|
teljesítések
|
Törzskonstrukció (E. coli)
|
Plazmid transzformáció (több gazdagép)
|
5
|
Kereskedelmi házigazdák tanúsítványa Törzsépítési jelentés
|
PCR ellenőrzés
|
Törzs tisztítás
|
Törzs megőrzése
|
Törzsépítés (élesztő)
|
Kompetens élesztősejtek előkészítése
|
10
|
Plazmid linearizáció
|
Elektromos transzformáció
|
Rezisztencia/tápanyaghiány-szűrés
|
Törzs tisztítás
|
Törzs megőrzése
|
Megfelelő gazdaszűrés
|
Plazmid vagy genom DNS extrakció
|
15-20
|
Gazdaszűrési folyamat A mesterséges törzsek COA-ja
|
PCR verifikáció, restrikciós enzimes emésztés
|
Célgén szekvenálás
|
Magas expressziójú gazdaszervezetek szűrése
|
Genetikai stabilitással rendelkező gazdaszervezetek szűrése
|
Törzs megőrzése
|
Esettanulmány
Egy megfelelő gazdaszervezet 2.5-szeresére javítja a fehérje expressziós szintjét.
Megbíztak bennünket, hogy magas termelést fejlesszünk ki E. coli törzs. És háromféle reklámot próbáltunk ki E. coli a célfehérje jellemzői alapján. Kimutatták, hogy az S1-1 és S1-2 törzs (A. ábra: 1,2., 3.5. sáv) 3-szeresére javította a fehérjeszintet, mint a kliens kezdeti törzse (A. ábra: XNUMX. sáv).
Emellett az S1-1 törzs nagy genetikai stabilitást mutatott (B ábra), és az elsődleges sejtbanki (PCB) jelölt törzsként ismerték fel.
Szolgáltatási szolgáltatásaink
Bizonyított szakértelem különféle mikrobiális gazdákkal, pl. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink törzs 1/2/3/4; S.cerevisiae és a H. polymorpha.
Tapasztaltak vagyunk E. coli periplazmatikus szekréció, oldható és zárványtest expressziója, valamint élesztő intracelluláris vagy szekréciós expressziója. Nem adunk hozzá antibiotikumot, vagy a szabályozási útmutatás alapján adjuk hozzá az antibiotikumokat.
Létrehozunk egy nagy áteresztőképességű szűrési platformot a nagy termelésű és stabil törzsek szűrésére több mint száz jelölt törzsből.
A Good Data and Record Management keretében biztosított, hogy a törzs tervezési és szűrési folyamata nyomon követhető legyen.