Rekombinált enzim terápiás használatra
A biotechnológiai folyamatakkal kapcsolatos terápiás enzimök széles körben használnak több klinikai alkalmazás esetén, beleértve az enzim-helyettesítő terápiát, a felhalmozott metaboliták és mérgek bontását, a rákkezelést és a genom szerkesztést. Több terápiás enzimet mikrobiológiai kifejezési rendszerben is termelhetnek.
Rekombináns enzim anyagul
Több enzimet használnak hosszú kódoló RNA gyártásában (pl., mRNA, saRNA, circRNA), antitest–gyógyszer konjugátumok (ADC-k) gyártásában és más területeken. A mikrobiálisan termelt enzimek gazdaságosabbak a maradékos sejtrendszerhez képest, különösen az E. coli kifejezési rendszer.
Alkalmazás
|
Enzimek
|
Függvény
|
Enzimek lineáris RNA gyártásra, RNáz mentes
|
Korlátot tűznek a restrikció-endonukleázok
|
A plazmid DNS (pDNS) lineárisítása a hosszabb transkript generálásának elkerülése érdekében.
|
T7 RNA polymeráz (T7 RNAP)
|
Kötődnek a T7 promotorhoz és szpecifikus RNA-transkriptot generálnak; Játsszanak kulcsfontosságú szerepet az in vitro transkripció (IVT) reakció során.
|
Vaccínia fedélzeti enzim
|
Adják hozzá a fedélzeti szerkezeteket az IVT mRNA 5′-végéhez.
|
Pirofoszfatasz, inorganikus (iPPase)
|
Előzék meg a pirofoszfát képzését az IVT-reakció során.
|
RNáz inhibitor, rekombinált
|
Inhibálnak az RNáz tevékenységét az IVT-reakció során.
|
DNáz I
|
Eltávolítsa a DNA-sablonot.
|
Enzyme for circRNA production, RNase-free
|
Rnáz R
|
Lineáris RNA megsemmisítése és körkörű RNA gazdagítása.
|
Enzim-mediatált glikán konjugáció
|
Peptid-N-glikozidáz (PNGase F)
|
Elvágja az amid kötést az első székes GlicNAc és az Asn297 oldalketten; IgG-antitestekből felszabadítja a glikánokat.
|
Baktériális transglutamináz (BTG)
|
Helyspecifikus konjugátumok előállítása ADC-k generálásához.
|
Sortáz A
|
Katalizálja a fehérjék ligázását.
|
β1,4-galaktosidáz
|
Felszabadítja az összes végleges galaktózot és egy homogén G0 izofórmát alkot az antitestből.
|
β1,4-galaktosziltranzferáz (Gal-T)
|
Átvitel egy cukormaradékkal egy kémiai reaktiv funkcionális csoporttal.
|
α2,6-sialiltranzferáz (Sial T)
|
Beépíti a terminális sziatinsav maradékokat az antitest természetes glykán szerkezetébe.
|
Enzim-mediatált glykan átalakítás és glykoingenyerekedés
|
Endo-N-asetilglucozaminidáz (ENGase)
|
Hidrolizálja a β1,4-glikozidikus kötést GlcNAcβ1–4GlcNAc N-glikánok között; Eltávolítja az N-hivatkozott glykánokat az IgG antitestek Fc régiójából.
|
Endoglukozidáz S (EndoS)
|
|
Glikoziltranzferázok (GTs)
|
Átveszik az N-glicánt oxazolinát a defukozált IgG-kre.
|
EGYÉB
|
Enzimek mikrobiológiai ágensz általán produálva
|
Testreszabott igény
|
Rekombináns Enzim mint Reagensz
Címke eltávolító proteázok
A fúziós címkék gyakran használnak a megoldhatóság és stabilitás javítása érdekében, valamint könnyebbé teszik a purifikációt. A gyakran használt címkék közé tartozik a His-címke, a maltoz-összetevő-proteín (MBP), glutathion-S-tranzferáz (GST) stb.
Általánosan hozzáadnak egy linkersorozatot a fúziós címke és a célcsepp sorozata között a címke eltávolításához. A fúziós címkék eltávolítása helyspecifikus proteázokra van szükség, például enterokinázisra (EK), trombinra, tobacco etch vírus proteázisra (TEVp), emberi rinovírus proteázis 3C-ra (HRV3C), kis ubiquitin módosító fehérje (SUMO) proteázisra, tobacco vein mottling vírus (TVMV) proteázisra és karboksipeptidázis A/B-ra (CPA/CPB).
Típus
|
Enzimek
|
Felfedezési hely
|
Címke eltávolító endoproteázok
|
Enterokináza (EK), enteropeptidáz
|
DDDDK↓
|
trombin
|
LVPR↓GS
|
TEV proteáz
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C proteáz
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO proteáz
|
SUMO harmadrendű szerkezet
|
TVMV proteáz
|
ETVRFQG↓S
|
Címke eltávolító exoproteázok
|
Carboxypeptidáz A (CPA)
|
C-szélső aminosavak, kivéve a Pro, Lys és Arg
|
Carboxypeptidáz B (CPB)
|
C-szélső Lys és Arg
|
Egyéb Proteázák, Nukleázák és Amidázák
Alkalmazás
|
Enzimek
|
Függvény
|
Egyéb proteázák
|
Proteáz K
|
Egy serin proteáz, amely fehérjeket hydrolyzál péptid-kötések felbontásával.
|
IdeS, IgG proteáz
|
IgG felosztó enzim (Ides), amely egy konkrét helyen metszi az immunoglobulin G (IgG)-t, Fab és Fc törzsöket generálva.
|
IgA1 proteáz
|
Egy proteolitikus enzim, amely egy adott helyen metszi a humán immunoglobulin A1 (IgA1) csuklós régiójának sorozatát.
|
Nukleáz
|
Nukleáz
|
Felosztja a nukleinsavakat (DNA-t vagy RNA-t) a foszfodiéter-kötések hydrolyzálásával.
|
Restrikció enzim
|
Egy endonukleáz, amely a DNA-t egy vagy közel egy adott helyen metszi.
|
Amidáz
|
PNGase F
|
Kapcsolatot tör a legbeljebb lévő N-acecilszúcukroz (GlcNAc) és az asparagin részecskék között a magas mannosz, hibrid és összetett oligoszacharideken.
|
Yaohai Bio-Pharma Egy Állású CDMO Megoldást Kínál Recombináns Enzymekre
Hivatkozás:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. A múlt, jelen és jövő az enzym-alapú terápiákban. Drug Discov Today. 2022 január;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.