همه دسته بندی ها
DNA کوچک دایره

شرط

DNA کوچک دایره

DNA Minicircle (mcDNA) یک ناقل DNA غیر ویروسی کوچکتر است که از یک ساختار شبه DNA پلاسمید والدین مشتق شده است. DNA کوچک دایره با DNA پلاسمید معمولی متفاوت است زیرا حاوی پروموتور و ژن مورد نظر (GOI)، بدون منشا همانندسازی (ORI) و نشانگر انتخاب (selMark) است. DNA مینی دایره در باکتری ها از طریق نوترکیبی in vivo برای حذف توالی های اضافی (که مینی پلاسمید نامیده می شود) از DNA پلاسمید تولید می شود. به دلیل ایمنی، DNA minicircle به عنوان یک ناقل غیر ویروسی برای ژن درمانی، واکسن‌های DNA و غیره محبوبیت پیدا کرده است.

图片

شکل 1. ساختار DNA پلاسمید (pDNA) و DNA Minicircle (mcDNA)

سیستم های نوترکیبی DNA Minicircle

چهار سیستم نوترکیبی DNA مینی دایره اصلی در داخل بدن وجود دارد که مورد مطالعه قرار گرفته است، از جمله فاژ اینتگراز λ، Phage P1 Cre recombinase، ParA resolvase، PhiC31 integra se/I-SceI.

استراتژی

فاژ λ اینتگراز

Phage P1 Cre recombinase

ParA resolvase

PhiC31 integra se/I-SceI

مکانیزم

تیروزین ریکامبیناز، که از طریق پروتئین های FIS و IHF برای کاتالیز کردن نوترکیب سایت های هیبریدی att عمل می کند.

تیروزین ریکامبیناز مخصوص سایت، که یک نوترکیب دو طرفه را هنگام اتصال به سایت های loxP انجام می دهد.

سرین ریکامبیناز، که یک نوترکیب برگشت ناپذیر و یک جهته را بین دو سایت MRS یکسان انجام می دهد.

سرین ریکامبیناز، که واسطه نوترکیبی یک طرفه بین محل‌های اتصال attP/attB است، در حالی که اندونوکلئاز I-SceI ناخالصی‌های مربوط به محصول و پلاسمید والدین غیرترکیب را می‌شکافد.

امکانات

به بیان فاکتورهای میزبان FIS و IHF بستگی دارد. سمیت ذاتی؛ پلاسمید و مینی پلاسمید والدین باقیمانده

پلاسمید و مینی پلاسمید والدین باقیمانده

پربازده؛ پلاسمید و مینی پلاسمید والدین باقیمانده

تخریب پلاسمید والدینی عملکرد را کاهش داد

Yaohai Bio-Pharma راه حل CDMO یک مرحله ای را برای Minicircle DNA ارائه می دهد
مرجع:

[1] Almeida AM، Queiroz JA، Sousa F، Sousa Â. DNA Minicircle: آینده برای وکتورهای مبتنی بر DNA؟ روند بیوتکنول. 2020 اکتبر؛ 38 (10): 1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

دریافت نقل قول رایگان

با ما در تماس باشید