اهمیت غربالگری سویه
غربالگری هاست های مناسب برای توسعه CMC بیولوژیک ضروری است که کیفیت و ثبات محصول و فرآیند تولید را تعیین می کند. هدف مستقیم غربالگری میزبان، ارائه یک بانک سلولی اولیه (PCB) با سطوح بیان بالا و پایداری بالا هم از نظر پایداری عبور و هم از نظر پایداری ذخیره سازی است. غربالگری میزبان مناسب به دو دلیل اصلی ضروری است:
- ابتدا میزبان میکروبی با سطح بیان بالا انتخاب شود. چندین سویه تجاری موجود است که برای بیان انواع مختلف پروتئین ها مانند پروتئین های سمی، پروتئین های محلول یا پروتئین های یوکاریوتی استفاده می شود.
- دوم اینکه میزبان را با ثبات ژنتیکی غربال کنیم. آزمایش پایداری ژنتیکی یک نکته کلیدی در طول چرخه عمر تولید است. پیشنهاد می شود که پایداری ژنتیکی بالا به عنوان یکی دیگر از ویژگی های کلیدی برای سویه مناسب شناخته شود.
کلمات کلیدی: انتخاب سویه میکروبی، غربالگری سویه میکروبی، غربالگری با کارایی بالا باکتری یا مخمر، غربالگری سویه با تولید بالا، غربالگری سویه بسیار پایدار، غربالگری سویه پایدار ژنتیکی کاربرد: پزشکی انسانی، پزشکی حیوانی، واکسن، زیست شناسی مصنوعی، مولکول بزرگ نوترکیب بیولوژیک، معرف بیولوژیکی
خدمات غربالگری سویه Yaohai Bio-Pharma
با بهره مندی از بیش از 10 سال تجربه CDMO در بیولوژیک های میکروبی، ما از توسعه و ساخت مولکول های بزرگ مختلف، از جمله واکسن های زیر واحد نوترکیب، ذرات ویروس مانند (VLP)، هورمون ها (انسولین، GLP-1، هورمون رشد)، سیتوکین ها ( اینترلوکین-2/IL-2، IL-15، IL-21)، فاکتورهای رشد (EGF، FGF، NGF)، نانوبادی ها/آنتی بادی های تک دامنه (sdAbs)، آنزیم ها و غیره.
ما تجربیات غنی در انتخاب انواع مختلف ناقل های پلاسمید و میزبان های میکروبی از جمله باکتری ها به دست آورده ایم. اشریشیا کلی (E. coli)، و مخمر Pichia pastoris (P. pastoris)، Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae)، Hansenula polymorpha (H. polymorpha). ما می توانیم بهترین سیستم بیان را برای بیولوژیک های منحصر به فرد شما پیدا کنیم.
ما میزبانهای میکروبی مختلف را با منابع روشن و CoA استاندارد جمعآوری کردیم E.coli بیان و بیان مخمر.
جزئیات خدمات
خدمات ما
|
جزئیات خدمات
|
حداقل جدول زمانی/روز
|
تحویل
|
ساختار سویه (E. coli)
|
تبدیل پلاسمید (چند میزبان)
|
5
|
COA میزبان های تجاری گزارش ساخت و ساز سویه
|
تایید PCR
|
تصفیه کرنش
|
حفظ کرنش
|
ساخت سویه (مخمر)
|
آماده سازی سلول های مخمری شایسته
|
10
|
خطی سازی پلاسمید
|
تبدیل الکتریکی
|
غربالگری مقاومت/کمبود تغذیه ای
|
تصفیه کرنش
|
حفظ کرنش
|
غربالگری میزبان مناسب
|
استخراج DNA پلاسمید یا ژنوم
|
15-20
|
فرآیند غربالگری میزبان COA سویه های مهندسی شده
|
تایید PCR، هضم آنزیم محدود
|
توالی یابی ژن هدف
|
غربالگری هاست های با بیان بالا
|
غربالگری میزبان با ثبات ژنتیکی
|
حفظ کرنش
|
بررسی موردی
میزبان مناسب سطح بیان پروتئین را 2.5 برابر بهبود می بخشد.
ما مأمور به توسعه تولید بالا هستیم باکتری E. coli نژاد. و ما سه نوع تجاری را امتحان کردیم باکتری E. coli میزبان ها، بر اساس ویژگی های پروتئین هدف. نشان داده شده است که سویه S1-1 و S1-2 (شکل A: خط 1,2،3.5) سطح پروتئین را تا 3 برابر نسبت به سویه اولیه مشتری بهبود بخشید (شکل A: خط XNUMX).
علاوه بر این، سویه S1-1 پایداری ژنتیکی بالایی داشت (شکل B) و به عنوان سویه کاندید برای بانکداری سلولی اولیه (PCB) شناخته شد.
ویژگی های خدمات ما
تخصص نشان داده شده با میزبان های میکروبی مختلف، به عنوان مثال، باکتری E. coli DH5α، TOP10، Trans10، BL21; P. pastoris SMD1168H، X-33، GS115، سویه PichiaPink1/2/3/4; S.cerevisiae و H. polymorpha.
ما با تجربه هستیم باکتری E. coli ترشح پری پلاسمیک، بیان بدن محلول و داخل، و همچنین بیان داخل سلولی یا ترشحی مخمر. ما هیچ آنتی بیوتیکی اضافه نمی کنیم یا آنتی بیوتیک ها را تحت هدایت نظارتی اضافه می کنیم.
ما یک پلت فرم غربالگری با توان عملیاتی بالا برای غربالگری سویههای پرتولید و پایدار از بیش از صد سویه کاندید ایجاد میکنیم.
تضمین می شود که فرآیند مهندسی کرنش و غربالگری تحت مدیریت داده ها و رکوردهای خوب قابل ردیابی است.