سنتز saRNA سفارشی
mRNA خودتقویت شونده (saRNA) که با نام replicon RNA نیز شناخته می‌شود، توالی‌های mRNA رونویسی in vitro (IVT) و ژن‌های replicase ویروسی مشتق شده از آلفاویروس یا فلاوی ویروس‌ها را رمزگذاری می‌کند. ژن‌های replicase ویروسی امکان تقویت خود mRNA را فراهم می‌کنند که منجر به افزایش بیان پروتئین و حداقل دوز مورد نیاز RNA در مقایسه با mRNAهای غیر تقویت‌کننده می‌شود. جنبه دیگر این است که saRNA یک مولکول نسبتا بزرگ (بیش از 14 کیلوبایت) است.
Yaohai Bio-Pharma مجموعه‌ای از فن‌آوری‌های سنتز mRNA را برای ارائه mRNA غیرتقویت‌کننده و mRNA خودتقویت‌شونده (1000 nt~14000 NT)، مانند طراحی و بهینه‌سازی توالی، IVT، خالص‌سازی، لیوفیلیزاسیون و نانوذرات لیپیدی (LNP) ایجاد کرده است. . همه محصولات تحت استانداردهای کنترل کیفیت دقیق عرضه می شوند.
شکل 1 ویژگی های ساختاری mRNA های IVT: mRNA معمولی، دایره ای و خود تقویت کننده.
ویژگی های توالی mRNA خودتقویت شونده
RNA خودتقویت‌شونده شامل چهار پروتئین غیرساختاری (با نام‌های nsP1، nsP2، nsP3 و nsP4) است که از آلفاویروس‌ها، ویروس آنسفالیت اسب ونزوئلا (VEEV) مشتق شده‌اند. در این میان، nsP1 فعالیت های آنزیمی دوگانه، یعنی GTase و N7MTase را نشان می دهد، در حالی که nsP2 دارای فعالیت RTPase است، که برای دربندی mRNA IVT برای تولید ساختار Cap 0 ضروری است. علاوه بر این، nsP2 به عنوان یک پروتئاز و هلیکاز عمل می کند و پردازش پیچیده کل مجموعه nsP را تسهیل می کند. عملکرد دقیق nsP3 مبهم باقی مانده است، با این حال در تعامل با پروتئین های سلول میزبان متنوع است، در نتیجه به تضعیف پاسخ ضد ویروسی نصب شده توسط میزبان کمک می کند.
یک ناحیه پروموتر زیر ژنومیک آلفاویروس (SGP) قبل از ژن مورد نظر (GOI) قرار دارد. عنصر SGP شروع رونویسی GOI را با دور زدن خواندن توالی کدکننده پروتئین‌های nsP ویروسی تسهیل می‌کند.
شکل 2 سنتز و سنجش سلولی eGFP saRNA پلتفرم Yaohai Bio-Pharma RNASci.
راه حل های سفارشی saRNA
پروتکل سنتز saRNA مشابه mRNA است: سنتز mRNA سفارشی
- طراحی سکانس
- آماده سازی قالب پلاسمید
- رونویسی در شرایط آزمایشگاهی (IVT)
- پوشش آنزیمی mRNA
- پوشش همزمان رونویسی mRNA
- خالص سازی mRNA
- لیوفیلیزاسیون mRNA
- کپسوله سازی LNP
- تجزیه و تحلیل و آزمایش
FA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نه
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
AF
MS
BE
MK
UR
BN
