آماده سازی CircRNA به RNA خطی به عنوان ماده پیش ساز (پیش ساز RNA) برای چرخه سازی نیاز دارد، جایی که پیش ساز RNA معمولاً با استفاده از DNA پلاسمید خطی شده به عنوان الگوی رونویسی تهیه می شود و در شرایط آزمایشگاهی با کمک RNA پلیمراز T7 رونویسی می شود.
DNA پلاسمید با کیفیت بالا برای رونویسی آزمایشگاهی (IVT) ضروری است. بر اساس پلت فرم خدمات آماده سازی پلاسمید بالغ، Yaohai Bio-Pharma می تواند خدمات آماده سازی پلاسمید DNA (pDNA) خطی شده با خلوص بالا و استاندارد را برای اطمینان از یکپارچگی محصولات IVT ارائه دهد.
جزئیات خدمات
| روند |
خدمات اختیاری |
جزئیات خدمات |
مدت تحویل (روز کاری) |
| آماده سازی پلاسمید دایره ای |
سنتز ژن |
سنتز ژن (شخص ثالث) |
7-10 |
| تقویت پلاسمید |
تقویت پلاسمید |
2 |
| استخراج پلاسمید |
| آماده سازی پلاسمید خطی شده |
خطی سازی و خالص سازی پلاسمید |
خطی سازی پلاسمید |
1 |
| خطی سازی تصفیه DNA |
| کنترل کیفیت DNA پلاسمید |
خلوص غلظت |
اسپکتروفتومتری فرابنفش (UV). |
1-2 |
| ترکیب پلاسمید |
الکتروفورز ژل آگارز (AGE) |
| الکتروفورز مویرگی (CE) - اختیاری |
| شناسایی پلاسمید |
شناسایی آنزیم محدود کننده/ AGE |
ویژگی های ما
انتخاب انعطاف پذیر روش های خطی سازی
بهینه‌سازی روش‌های استخراج و خالص‌سازی DNA برای دستیابی به نرخ بازیابی بالا.
استانداردهای سختگیرانه کنترل فرآیند، با نرخ ترکیب فوق مارپیچی نمونه های پلاسمید برای تحقیقات بیش از 80٪.
خدمات آماده سازی پلاسمید و کنترل کیفیت با استاندارد بالا و کارایی بالا برای رفع نیازهای آزمایشی.
بررسی موردی
با در نظر گرفتن محصول Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA به عنوان مثال، نسبت supercoiled نمونه‌های پلاسمید الگوی رونویسی (درجه تحقیق) بیش از 70 درصد است، با نرخ خطی‌سازی نزدیک به 100 درصد.
mCherry circRNA با پلاسمید خطی شده به عنوان یک الگو تهیه می شود و به سلول های 293T ترانسفکت می شود. سطح بالای بیان فلورسانس (فلورسانس قرمز) پس از 24 ساعت ترانسفکشن تشخیص داده می شود که پس از 48 ساعت افزایش می یابد و همچنان در روز هفتم و روز چهاردهم پس از ترانسفکشن قابل تشخیص است.
پروتئین mCherry به طور پایدار و کارآمد بیان می شود و خلوص الگوی رونویسی می تواند نیاز محصول دارویی circRNA (DP) را با کیفیت بالا برآورده کند.
تایید بیان در شرایط آزمایشگاهی mCherry circRNA
FA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
نه
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
AF
MS
BE
MK
UR
BN
