پروتئازهای حذف تگ
برای بهبود قابلیت حلپذیری و سادگی کردن فرآیند تصفیه پروتئینهای بازسازی شده، محققان معمولاً تگهای ادغامی اضافه میکنند که از جمله آنها میتوان به تگ His، پروتئین متصلشونده به مالتوز (MBP) و گلوتاتیون-S-ترانسفراز (GST) اشاره کرد.
اگرچه تگ به عنوان یک دنباله اضافی پروتئین عمل میکند، برای حفظ فعالیت زیستی در صنعت داروسازی باید حذف شود. حذف تگهای ادغامی نیازمند آنزیمهای پروتئولیتیک خاص محل دارد، مانند آنتروکیناز (EK)، ترومبین، پروتئ아ز ویروس تب دخمه گیاهی سیگار (TEVp)، پروتئاز ویروس رینوی انسانی 3C (HRV3C)، پروتئاز پروتئین تغییرشکلدهنده اوبیکوئیت (SUMO)، پروتئاز ویروس لکه وریده سیگار (TVMV) و کاربکسی پپتیداز A/B (CPA/CPB).
TYPE
|
آنزیم
|
موقعیت شناسایی
|
پروتئازهای انتهوبوتیک برای حذف برچسب
|
انتروکیناز (EK)، انتروپپتیداز
|
DDDDK↓
|
ترومبن
|
LVPR↓GS
|
پروتئاز TEV
|
ENLYFQ↓G
|
پروتئاز HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
پروتئاز سومو
|
ساختار ثالثی سومو
|
پروتئاز TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
اکزوبروتئازهای حذف تگ
|
کاربکسی پپتیداز A (CPA)
|
اسیدهای آمینه C-ترمینال، به جز پرولین، لیزین و آرژینین
|
کاربکسی پپتیداز B (CPB)
|
لیزین و آرژینین C-ترمینال
|
پروتئازهای دیگر
درخواست
|
آنزیم
|
عملکرد
|
پروتئازهای دیگر
|
پروتئاز K
|
یک پروتئاز سرین که با هیدرولیز کردن پیوندهای پپتیدی پروتئینها را تجزیه میکند.
|
IdeS, پروتئاز IgG
|
انزیمهای تجزیهکننده IgG (Ides) که در محل خاصی از ایمونوگلوبولین G (IgG) قطع میکنند و فراگментهای Fab و Fc را تولید میکنند
|
پروتئاز IgA1
|
یک آنزیم پروتئولیتیک که سایت خاصی در دنباله ناحیه جنگلی ایمونوگلوبولین A1 (IgA1) انسانی را قطع میکند.
|
نوکلئاز
درخواست
|
آنزیم
|
عملکرد
|
نوکلئاز
|
نوکلئاز
|
قطع نوکلئیک اسیدها (DNA یا RNA) با هیدرولیز کردن پیوندهای فسفودیاستر.
|
انزیم محدودکننده
|
یک اندونوکلئاز که دیانای را در یا نزدیک نقاط خاص قطع میکند.
|
آمیداز
درخواست
|
آنزیم
|
عملکرد
|
آمیداز
|
PNGase F
|
بین گلوکوزamine داخلی و رزیدوهاي آسپاراجین موجود در اُلیگوساکاریدهای منان بالا، ترکیبی و هیبرید قطع میکند.
|
Yaohai Bio-Pharma راهحل CDMO یکپارچه برای عامل انزیمی ارائه میدهد