mRNA به طور گسترده در مطالعه عملکرد ژن یا پروتئین استفاده شده است. در همین حال، در توسعه بیولوژیک های پیشگیرانه و درمانی رایج است. به عنوان یک استراتژی سنتز متداول برای مولکولهای RNA، رونویسی در شرایط آزمایشگاهی (IVT) ما را قادر میسازد تا رونوشتهای سفارشیسازی شده را بهطور کارآمد به دست آوریم.
Yaohai Bio-Pharma مجموعهای از فناوریهای سنتز mRNA را برای ارائه RNA با کیفیت بالا، مانند طراحی و بهینهسازی توالی، IVT، خالصسازی، لیوفیلیزاسیون و محصورسازی نانوذرات لیپیدی (LNP) ایجاد کرده است. همه محصولات تحت استانداردهای کنترل کیفیت دقیق (QC) عرضه می شوند.
با شیوع بیماری همه گیر کووید-19 در سال 2020، فناوری mRNA با جهشی پیشرفت کرده است و تحقیقات و کاربردهای مرتبط با آن توسعه بی سابقه ای را به دست آورده است، از جمله واکسن های پیشگیری کننده برای پیشگیری از بیماری های عفونی، واکسن ها و داروها انکولوژی درمانی، درمان تومور، پروتئین. درمان جایگزین، پزشکی احیا کننده، و سلول و ژن درمانی (CGT).
واکسن mRNA | mRNA درمانی |
|
روند | خدمات اختیاری | جزئیات خدمات | مدت تحویل (روز کاری) | تحویل |
طراحی و بهینه سازی توالی mRNA | طراحی و بهینه سازی توالی کدنویسی | طراحی توالی CDS و بهینه سازی کدون | 1-3 | فایل توالی |
طراحی و بهینه سازی توالی های غیر کد کننده | طراحی و بهینه سازی توالی های UTR، polyA | |||
آماده سازی پلاسمید الگوی رونویسی | تهیه پلاسمید نوترکیب | سنتز ژن | 7-10 | |
تقویت و استخراج پلاسمید | 4 | |||
خطی سازی و خالص سازی پلاسمید | ||||
mRNA رونویسی In Vitro | درپوش رونویسی مشترک (روش تک مرحله ای) | رونویسی آزمایشگاهی (IVT) / آنالوگ کلاهک | 1-2 | N / A |
تغییرات نوکلئوتیدی (اصلاحات UTP/CTP) | ||||
حذف الگوی DNA (DNase I) | ||||
پوشش آنزیمی (فرایند دو مرحله ای) | IVT | 2-3 | ||
تغییرات نوکلئوتیدی (اصلاحات UTP/CTP) | ||||
حذف الگوی DNA (DNase I) | ||||
خالص سازی mRNA (کلرید لیتیوم / دانه های مغناطیسی) | ||||
پوشش آنزیمی | ||||
خالص سازی mRNA | طرح تصفیه معمولی | بارش لیتیوم کلرید | 1 | ماده دارویی mRNA |
تصفیه مهره مغناطیسی | ||||
طرح خالص سازی ستون کروماتوگرافی | ترکیبی از روش های کروماتوگرافی چندگانه | 1-2 | ||
تبادل بافر | اولترافیلتراسیون | 1 | ||
لیوفیلیزاسیون mRNA | لیوفیلیزاسیون | پیش انجماد | 2-3 | پودر لیوفیلیزه mRNA |
خشک کردن اولیه (تععید) | ||||
خشک کردن ثانویه ( دفع ) | ||||
mRNA کپسوله سازی | کپسوله سازی LNP | کپسوله سازی LNP | 2-3 | محصول mRNA-LNPDrug |
غلظت و تبادل بافر | ||||
تجزیه و تحلیل کیفیت mRNA | ماده دارویی mRNA / پودر لیوفیلیزه | تمرکز، خلوص | 1 | گزارش تست |
یکپارچگی، کارایی درپوش، توزیع دم polyA | 2-5 | |||
محصول دارویی mRNA-LNP | کارایی کپسولاسیون | 1 | ||
اندازه و توزیع ذرات | ||||
شارژ سطحی | ||||
اعتبار سنجی بیان mRNA | ارزیابی سلول 293T | آبکاری سلولی | 4 | |
انتقال گذرا سلول ها | ||||
مشاهده سیگنال فلورسانس | 1-3 | |||
وسترن بلات (WB)/ سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) |
5' کلاه | ▪ بدون درپوش ▪ Cap0، همپوشانی ▪ Cap1، همپوشانی ▪ درپوش 1، درپوش آنزیمی |
5' UTR/3' UTR | ▪ دنباله Nature UTR ▪ توالی UTR جهش یافته/مهندسی |
3' PolyA Tail | ▪ دم 100 تا 120 آمپر (توصیه می شود) ▪ دم polyA قطعه بندی شده ▪ دیگر دم های سفارشی |
نوکلئوزیدهای اصلاح شده | ▪ پایه های اصلاح نشده ▪ سودوریدین (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-متیل سیتوزین (m5C) ▪ 5-متیلوریدین (m5U) ▪ 5-متوکسیوریدین (5moU) ▪ ۲-تیوریدین (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ سایر اصلاحات |
جریان خدمات یکپارچه
ارائه یک سری خدمات از طراحی توالی جلویی تا تهیه mRNA پشتی، کنترل کیفیت و اعتبار سنجی بیان.
طراحی و بهینه سازی سکانس های پیشرفته بین المللی
طراحی و بهینه سازی توالی mRNA حرفه ای بیان کارآمد mRNA را تسهیل می کند.
تغییرات نوکلئوتیدی متنوع
به طور موثر بیان mRNA را افزایش می دهد و پاسخ های ایمنی نامطلوب mRNA را کاهش می دهد.
پلت فرم تصفیه بالغ
با ترکیب یک روش خالص سازی معمولی و خود طراحی، نمونه های mRNA با خلوص بالا به دست می آیند.
پلت فرم QC کامل
گزینههای QC را برای برآورده کردن الزامات آزمایشهای معمول، مانند غلظت، خلوص A260/280، و یکپارچگی، و همچنین الزامات کنترل کیفیت بالا، مانند کارایی دربندی/توزیع polyA، غنی کنید.
تحویل سریع
mRNA سفارشی شده را می توان در 7 روز به جز برای سنتز توالی برون سپاری شده تحویل داد.