DNA پلاسمید، به عنوان در شرایط in vitro الگوی رونویسی (IVT)، یک ماده خام مهم برای تولید mRNA است. راندمان بالا، خالصسازی بالا و بازیابی بالای DNA پلاسمید مهمترین عامل است هدف در طول توسعه فرآیند پلاسمید
Yaohai Bio-Pharma راه حل یک مرحله ای را برای توسعه پلاسمید، از جمله توسعه فرآیند بالادست (تخمیر)، پایین دست (تصفیه) و شناسایی فرآیند و اعتبار سنجی فرآیند ارائه می دهد. ما تجربه گسترده ای در بهبود بازده پلاسمید و جداسازی آن از ماتریس های پیچیده با توسعه و بهینه سازی فرآیندهای تخمیر، تصفیه و حذف ناخالصی ها داریم.
فرآیند زیستی اساسی برای ساخت پلاسمید شامل موارد زیر است: اشریشیا کلی (E. coli) تخمیر، برداشت سلول و لیز قلیایی، شفاف سازی، غلظت، فرآیند کروماتوگرافی سه مرحله ای (گرفتن، خالص سازی میانی و پرداخت)، و غلظت.
جزئیات خدمات | عملیات واحد | پارامترهای |
باکتری E. coli تخمیر |
فلاسک را تکان دهید | ترکیبات محیطی، آنتی بیوتیک، حجم تلقیح، دمای رشد و غیره. |
تخمیر کننده (7 لیتر) |
آنتی بیوتیک، حجم تلقیح، دمای رشد، pH، اکسیژن محلول (DO)، حالت تغذیه (به عنوان مثال، تغذیه دسته ای)، محیط تغذیه، زمان تخمیر و غیره. |
|
برداشت سلولی | میکرو فیلتر کردن | استاندارد باکتری E. coli فرآیند برداشت |
لیز سلولی | تعلیق مجدد سلولی، لیز قلیایی، خنثی سازی | نسبت قلیایی، زمان لیز |
روشنی | تصفیه | فیلتراسیون خام، 20 میکرومتر و یک قطار فیلتر 5 میکرومتری (ترجیحا) |
غلظت | اولترافیلتراسیون، فیلتراسیون جریان مماسی | اندازه منافذ (یا NMWC)، فشار گذرنده (TMP)، شار، نسبت حجم فیلتر به سطح غشاء |
کروماتوگرافی سه مرحله ای | کروماتوگرافی حذف اندازه (SEC) یا کروماتوگرافی فیلتراسیون ژل (GFC) | طول و قطر ستون، ترکیب بافر، حجم تزریق، ترکیب فاز متحرک (جذب و دفع)، pH، سرعت جریان، تعادل، اتصال، شستشو و شرایط شستشو. |
کروماتوگرافی میل ترکیبی (AF) | ||
کروماتوگرافی تبادل آنیونی (AEX) | ||
غلظت | اولترافیلتراسیون، فیلتراسیون جریان مماسی | اندازه منافذ (یا NMWC)، فشار گذرنده (TMP)، شار، نسبت حجم فیلتر به سطح غشاء |
راه حل های فرآیند تصفیه بیولوژیک بیشتر |