MRNA دایرهای (circRNA) به طور گستردهای در مطالعه توابع ژن یا پروتئین استفاده شده است. همچنین، در توسعه بیولوژیکهای پیشگیرانه و درمانی محبوب است، مشابه mRNA.
Yaohai Bio-Pharma مجموعهای از فناوریهای سنتز circRNA را برای ارائه RNA با کیفیت بالا، مانند طراحی و بهینهسازی دنباله، نوشتهگری در محیط بیرونی (IVT)، دایرهایسازی، تصفیه و بستهبندی در ذرات نانو لیپیدی (LNP) ایجاد کرده است. تمام محصولات تحت استانداردهای کنترل کیفیت (QC) صریح منتشر میشوند.
در مقایسه با آر ان ای خطی، آر ان ای دایرهای (circRNA) از نظر ساختاری پایدارتر است و یکی از موضوعات مهم در تحقیقات مربوط به داروهای نوکلئیک اسید در حال حاضر محسوب میشود. این آر ان ای کاربردهای گستردهای در حوزههای مختلف دارد، همچنین برای circRNA کدگذار و غیرکدگذار شامل واکسنهای پیشگیرانه بیماریهای عفونی، واکسنهای درمانی سرطان، داروهاي درمانی سرطان، درمان جایگزین پروتئین، پزشکی تجدیدحیات، درمان سلولی و ژنتیکی (CGT)، نقش اسپانج مولکولی و آپتامر آر ان ای.
فرآیند | سرویس اختیاری | جزئیات خدمات | مدت زمان تحویل (روز) |
طراحی و بهینهسازی دنباله circRNA | طراحی و بهینهسازی دنبالههای کدگذاری | بهینهسازی کدون CDS | 1 |
طراحی و بهینهسازی توالیهای غیر کدگذار | طراحی و بهینهسازی دنبالههای اینترون و اکسون، بازوی همخوان و فاصلهگذار | ۱-۲ | |
آمادهسازی پلاسمید دایرهای | 합성 ژن | 합성 ژن (سومین طرف) | ۷-۱۰ |
افزایش پلاسمید | افزایش پلاسمید | 2 | |
استخراج پلاسمید | |||
تهیه پلاسمید خطیسازی شده | خطیسازی و پاککردن پلاسمید | خطیسازی پلاسمید | 1 |
تصفیه دانهکار خطیسازی شده | |||
ترانسکریپشون در محیط بیرونی سلول و سیکلیزاسیون | ترانسکریپشون در محیط بیرونی سلول و سیکلیزاسیون | واکنشهای ترانسکریپشون در محیط بیرونی سلول و سیکلیزاسیون | ۱-۲ |
هضم RNase R | |||
بهینهسازی - اختیاری | ترکیب واکنش، بهینهسازی زمان | 2 تا 5 | |
پاکسازی circRNA | روش پاککنی معمولی | رسوبزنی کلرید لیتیوم | 1 |
پاکسازی ذرات مغناطیسی | 1 | ||
پاککنی circRNA بسیار خالص | کروماتوگرافی مایع Prestive عملکرد بالا (HPLC) | ۱-۲ | |
تعویض بافر | فراتفلتراسیون | 1 | |
لیوفیلیزاسیون circRNA | پر کردن نمونه | پرکننده | 2-3 |
لیوفیلیزاسیون | یخ زدن پیش از لیو | ||
خشک شدن اولیه (زیرنما) | |||
خشک شدن ثانویه (جذب معکوس) | |||
حباببندی circRNA-LNP | حباببندی LNP | پیشآمادهسازی ماده و مایع | 2 |
آمیزش با دستگاه میکروفلویدیک | |||
تعویض بافر | فیلتراسیون جریان مماسی | 1 | |
قطره کردن | فیلتراسیون | ||
کنترل کیفیت DNA پلاسمید | Carthy/concentration | فوتومتر ماده Ultraviolet (UV) | ۱-۲ |
تصویربندی پلاسمید | الکتروفورز جل آگاروز (AGE) | ||
الکتروفورز کپیلری (CE)-اختیاری | |||
شناسایی پلاسمید | شناسایی انزیم محدودکننده/AGE | ||
کنترل کیفیت circRNA | Carthy/concentration | فوتومتر ماده Ultraviolet (UV) | - |
صافی | الکتروفورز ژل آگاروز (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC-اختیاری | 1 | ||
کنترل کیفیت circRNA-LNP | کارایی بستهبندی | روش RiboGreen | 1 |
اندازه ذرات | پراکندگی نور دینامیک (DLS) | 1 | |
شاخص چندتودی | پراکندگی نور دینامیک (DLS) | 1 | |
잠utomotive پتانسیل | پراکندگی نور دینامیک (DLS) | 1 | |
آزمایش قدرت مبتنی بر سلول | انتقال ژن به سلول | قرار دادن سلول، انتقال ژن به سلول | 4 |
تشخیص پروتئین هدف | مشاهده فلوئورسنت، غرب آمريكایی/ELISA | 1-3 |
ما ژن eGFP circRNA، mCherry circRNA و luciferase circRNA را به سلولهای 293T منتقل کردیم و پروتئین هدف را از طریق سیگنال فلوئورسنت، لومینوسیت یا رنگ، غرب آمريكایی (WB) و آزمایش ELISA تشخیص دادیم.
آزمایشهای قدرت مبتنی بر سلول نمونههای circRNA توسط Yaohai Bio-Pharma