همه دسته‌بندی‌ها
ENEN
پوشاندن همزمان mRNA

پوشاندن همزمان mRNA

صفحه اصلی >  RNA IVT  >  합성 RNA سفارشی  >  سنتز mRNA سفارشی  >  پوشاندن همزمان mRNA

RNA IVT

میزبانی همزمان mRNA

برخلاف روش میزبانی آنزیمی دو مرحله ای، روش میزبانی همزمان یک مرحله ای می تواند جریان فرآیند را به طور قابل ملاحظه ای کاهش دهد. این روش نتیجه گراست و شامل افزودن شبیه ساز های میزبان به واکنش ترجمه درون زیستی (IVT) است. شبیه ساز های میزبان می توانند در آغاز ترجمه معرفی شوند و پس از تکمیل ترجمه، mRNA با ساختار میزبان حاصل می شود. شبیه ساز های میزبان نسل سوم فعلی می توانند میزبانی معکوس را جلوگیری کرده و ساختار میزبان 1 را مستقیماً به محصول ترجمه اضافه کنند.

برای در نظر گرفتن ایمنی‌زایی mRNA درون زنده و کارایی ترجمه، فرآیند IVT اغلب از نوع خاصی از NTP های اصلاح شده استفاده می کند و نوکلئوتیدهای اصلاح شده متداول عبارتند از: پسیودویوریدین (Ψ)، N1-متیل-پسیودویوریدین (N1Ψ) و سیتوزین 5-متیل (5mC).

undefined

undefined

شکل: نمودار واکنش میزبانی و ترجمه همزمان mRNA

جزئیات خدمات

سرویس

جزئیات خدمات

دوره تحویل (روز کاری)

میزبانی همزمان

پاسخ انتقالی در محیط بیرونی سلول (انالوگ کلین کپ) ۱-۲
تغییرات نوکلئوتیدی (Ψ/ن1Ψ/5mC)
حذف الگوی DNA (دناز I)

بهینه‌سازی شرایط IVT - اختیاری

طراحی و بهینه‌سازی مولفه‌های واکنش ۳ تا ۷
ویژگی‌های ما
  • روش‌های مختلف تغییر نوکلئوتیدی

استفاده از روش‌های مختلف تغییر نوکلئوتیدی می‌تواند بیان پروتئین را بهبود بخشد.

  • سیستم واکنش بهینه‌سازی‌شده

درجه بالایی از نسبت انتقال و کارایی بالا در فرآیند کپینگ به دست آورید.

  • فرآیند ثابت کپینگ

نرخ گلوله‌بندی بیش از 95% را دستیابی کنید.

  • کنترل سختگیرانه RNase

با کنترل سختگیرانه RNase در محیط آزمایشی و مصرفی، تجزیه mRNA را به طور مؤثر جلوگیری کنید.

مطالعه موردی

یائوهای بیو-فارما یک پلتفرم فرآیند گلوله‌بندی هم‌نوشتاری بازمatur استقرار داده است که از کپ های شباهت‌دار تمیز استفاده می‌کند تا ساختار Cap1 را در حالی که گلوله‌بندی معکوس را جلوگیری می‌کند، مستقیماً اضافه کند. پس از پیش‌آماده‌سازی نمونه بر اساس استاندارد و تشخیص الکتروفورز کپیلر (CE)، نرخ گلوله‌بندی پروتئین فلوئورسنت سبز افزوده (eGFP) mRNA بیش از 95% می‌تواند دستیابی شود.

图片图片

کارایی گلوله‌بندی mRNA eGFP بیش از 95%

MRNA eGFP و mRNA mCherry که با گلوله‌بندی هم‌نوشتاری آماده شده‌اند، به سلول‌های 293T منتقل می‌شوند و پس از 48 ساعت، سیگنال فلوئورسنت قوی مشاهده می‌شود که نشان می‌دهد mRNA به طور کارآمد در سلول‌های 293T بیان می‌شود.

图片

بیان mRNA eGFP و mRNA mCherry در سلول 293T

دریافت پیشنهاد رایگان

Get in touch