محصولات حاصل از سیکلبندی در محیط بیرونی سلول و غنیسازی RNase R نیاز به پاککردن بیشتر از ترانسکریپش در محیط بیرونی سلول (IVT) دارند، شامل زیرمنابع مصرفنشده در واکنش سیکلبندی، محصولات جانبی واکنش و RNA شکسته شده.
Yaohai Bio-Pharma راهحلهای مختلف پالایشی مانند روش فروریز LiCl، پالایش ذرات مغناطیسی و روش پالایش خودتوسعهیافته را برای حذف انواع آلودگیها و آمادهسازی circRNA با درجه خلوص بالا ارائه میدهد.
راهحل پالایش برای مقدار کم circRNA برای تراسفکشن سلولی و به عنوان بخشی از آزمایشهای حیوانی.
حلول پاکسازی برای مقدار کم cRNA برای تراسفکتیون سلولی و به عنوان بخشی از آزمایشات حیوانی.
سناریوهای کاربردی با کیفیت بالاتر؛
فرآیند پاکسازی ثابت و قابل مقیاس برای برآورده کردن نیازهای تولید GMP.
فرآیند | سرویس اختیاری | جزئیات خدمات | مدت زمان تحویل (روز) | محصولات تحویلی |
پاکسازی circRNA | راهحل پاکسازی معمولی | رسوبزنی کلرید لیتیوم | 1 | ماده دارویی circRNA |
پاکسازی ذرات مغناطیسی | ||||
پاککنی circRNA بسیار خالص | کروماتوگرافی مایع عملکرد بلند تهیهای (HPLC) | ۱-۲ | ||
تعویض بافر | فراتفلتراسیون | 1 | ||
کنترل کیفیت circRNA | تمرکز/پاکسازی | فوتومتر ماده Ultraviolet (UV) | 0.5 | گزارش تست |
صافی | الکتروفورز ژل آگاروز (AGE)/E-Gel | |||
HPLC-اختیاری | 1 |
سناریوهای کاربردی قابل دستیابی هستند.
circRNA با خالصی بیش از 90٪;
با نظارت دقیق بر RNases در محیط آزمایشگاهی و مصرفیها، تجزیه RNA به طور مؤثر جلوگیری میشود.
Yaohai Bio-Pharma راهحل پاکسازی circRNA بالغ و آمادهای ایجاد کرده است که میتواند آلودگیهای مرتبط با فرآیند را حذف کند.
محصولات RNA دایرهای پاکشده توسط راهحل معمول همچنان به طور واضح با RNA شکسته و اینترونها مخلوط هستند.
پس از استفاده از راهحل پاکسازی توسعهیافته توسط Yaohai Bio-Pharma، آلودگیهای خطی RNA مانند RNA شکسته و اینترونها با موفقیت حذف میشوند.
اعتبارسنجی بیان circRNA
با استفاده از لیپوزوم معمولی، cRNA eGFP پاک شده به سلولهای 293T منتقل میشود و سیگنال فلوئورسنتی پس از 24 ساعت مشاهده میشود و در 48 ساعت افزایش مییابد. سیگنال فلوئورسنت همچنان در روز هفتم و روز چهاردهم پس از منتقلشدن قابل تشخیص است.