صفحه اصلی > RNA IVT > تحلیل و آزمایش mRNA > آزمایش‌های قدرت گردهمی بر پایه سلول
با توسعه سریع واکسن‌ها و درمان‌های mRNA، نیاز به یک پنل خاص از روش‌های تحلیلی برای تست قدرت (تعریف فعالیت بیولوژیکی آنها) وجود دارد که شامل کارایی ترجمه mRNA است. این روش‌ها معمولاً بر اساس انتقال سلولی و آزمایش‌های عملکردی پروتئین هدف هستند.
یائوهای بیو-فارما آزمایش‌های قدرت مبتنی بر سلول برای مواد دارویی mRNA یا محصولات LNP ارائه می‌دهد، شامل انتقال سلولی (293T، HepG2، HeLa، K562، U937، Raw264.7 سلول‌ها و غیره) و آزمایش‌های ELISA یا Western Blotting (WB).
بر اساس نظرات تنظیمی WHO، «قدرت هر دسته از واکسن نهایی باید با استفاده از روش کمی و اعتبارسنجی شده مناسبی تعیین شود. آزمایش‌های پتانسیل ممکن در محیط درون زیستی شامل سیستم‌های ترانسفکشن سلولی یا آزمایش‌های بدون سلول می‌توانند باشند.» همچنین USP به «آزمایش مبتنی بر سلول» برای آزمایش قدرت mRNA، یعنی بیان پروتئین هدف، پیشنهاد داد.
|
تحلیل |
روش‌ها |
|
آزمایش‌های قدرت |
ترانسفکشن مبتنی بر سلول و شناسایی پروتئین هدف: سلول‌های 293T، HepG2، HeLa، K562، U937، Raw264.7، و غیره. |
مرحله 1. ترانسفکشن مبتنی بر سلول با mRNA یا mRNA-LNP
سلول‌ها کشت و با mRNA یا mRNA-LNP ترانسفکت می‌شوند. جزئیات: mRNA پس از مخلوط شدن با عامل ترانسفکشن ترانسفکت می‌شود، در حالی که mRNA-LNP مستقیماً به سلول‌ها ترانسفکت می‌شود. پس از 24-48 ساعت، با استفاده از سنتrifوژ، سپرناهای حاوی پروتئین بیان شده را روشن می‌کنیم.
مرحله 2. آزمایش‌های عملکردی پروتئین هدف
آزمایش‌های ELISA یا WB را انجام دهید تا جهت ارزیابی ارتباط عملکردی پروتئین‌های هدف انجام شود.
آزمایش‌های قدرت‌سنجی مبتنی بر سلول برای نمونه‌های mRNA
یائوهای-بیو فارما روش آزمایش قدرت‌سنجی مبتنی بر سلول برای mRNA را توسعه داده است، شامل کشت سلولی، تراژستی سلولی و آزمایش‌های عملکردی پروتئین. ما mRNAهای eGFP، mCherry، لوسیفراس و پروتئین اسپایک را به سلول‌های 293T تراژستی کردیم و پروتئین هدف را از طریق سیگنال فلوئورسنت، لومینسنت یا رنگی، WB، ELISA تشخیص دادیم.
آزمایش‌های قدرت‌سنجی مبتنی بر سلول برای محصولات mRNA توسط یائوهای بیو فارما
یائوهای بیو-فارما در طول ۱۴ سال گذشته بر روی راهحلهای میکروبی CRDMO تمرکز کرده است. ما خدمات یکپارچه بیولوژیکی برای مشتریان در سراسر جهان ارائه میدهیم.
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
Copyright © Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. All Rights Reserved | سیاست حریم خصوصی
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN