تحلیل مکان N-گلیکوزیلاسیون برای درک عملکرد گلیکانها اهمیت دارد. یائوهای بیو-فارما از کروماتوگرافی مایع-طیف سنج جرمی (LC-MS) پس از قطع انزیمی برای تحلیل مکان N-گلیکوزیلاسیون استفاده میکند.
ما در توصیف ساختار پروتئینهای مختلف مولکولهای بزرگ، از جمله واکسنهای زیرمجموعهای بازتولیدی، نانوبدیها/ VHHs/ آنتیبادیهای تکدامنهای (sdAbs)، قطعههای آنتیبادی، هورمونها/پپتیدها، سیتوکاینها، عوامل رشد (GF)، انزیمها، کالاجنها، و غیره، درگیر بودهایم.
مقررات مربوط به مکان N-گلیکوزیلاسیون
بر اساس راهنمای ICH Q6B، «برای گلیکوپروتئینها، مقدار کربوهیدرات (شکرهای خنثی، شکرهای آمینو و اسید سیالیک) تعیین میشود. علاوه بر این، ساختار زنجیرههای کربوهیدرات، الگوی اُلیگوساکارید (پروفایل آنتنی) و محلهای گلیکوزیلاسیون در زنجیر پلیپپتیدی به اندازهای که امکانپذیر است تحلیل میشود.
روش تحلیلی
تحلیل |
روشها |
سایت N-گلیکوزیلاسیون |
کروماتوگرافی مایع-طیفسنجی جرمی (LC-MS) پس از قطع انزیمی |
رویهها
۱. تجزیه پروتئین با استفاده از ترپسین یا سایر پروتئازها
۲. جداسازی گلیکوپپتید های شکسته
۳. تأیید محل نگلیکوزاسیون توسط LC-MS
۴. تحلیل داده ها