بیوفارماکویات یائوهای خدمات آزمایش و تحلیل داده برای تعیین توالی انتهای N و همچنین تجزیه و تحلیل اصلاحات انتهای N با استفاده از روش کروماتوگرافی مایع- طیف سنجی جرمی (LC-MS) یا روش تخریب ادمان ارائه می دهد که به شما اجازه می دهد اسیدهای آمینه در انتهای پروتئین مورد علاقه خود را مشخص کنید.
ما در توصیف ساختار پروتئینهای مختلف مولکولهای بزرگ، از جمله واکسنهای زیرمجموعهای بازتولیدی، نانوبدیها/ VHHs/ آنتیبادیهای تکدامنهای (sdAbs)، قطعههای آنتیبادی، هورمونها/پپتیدها، سیتوکاینها، عوامل رشد (GF)، انزیمها، کالاجنها، و غیره، درگیر بودهایم.
المپادهای نظارتی برای Sequencing انتهای N
بر اساس راهنمای ICH Q6B، لازم است توالی پروتئین خود را تأیید کرده و انتهای آن را برای هرگونه تغییرات موجود بررسی کنید.
روش های Sequencing انتهای N
تحلیل |
روش |
سیکنسینگ N-ترمینال |
تخریب ادمان، کروماتوگرافی مایع- طیف سنجی جرمی (LC-MS) |
رویهها
LC-MS
۱. نشانهگذاری Florescent انتهای N پروتئین
۲. چندگانه سازی
۳. تحلیل LC-MS/ طیفسنجی جرمی (MS)
تخریب ادمان
۱. الکتروفرز ژل سدیم دودسیل سولفات (SDS) برای پروتئین هدف شما
۲. انتقال ژل به مموریهای پلیوینیلیدن فلوراید (PVDF) و رنگآمیزی
۳. شناسایی و برش باند پروتئین هدف
۴. توالییابی ادمان انتهای N
۵. تحلیل دادهها