پروتئازهای حذف برچسب
برای بهبود حلالیت و سادهسازی فرآیند خالصسازی پروتئینهای نوترکیب، محققان معمولاً برچسبهای همجوشی را اضافه میکنند که معمولاً از His-tag، پروتئین اتصال به مالتوز (MBP) و گلوتاتیون-S-ترانسفراز (GST) استفاده میشود.
در حالی که به عنوان یک توالی اضافی از پروتئین برچسب گذاری شده است، باید حذف شود تا فعالیت بیولوژیکی در صنعت داروسازی حفظ شود. حذف تگ های همجوشی به پروتئازهای خاص سایت مانند انتروکیناز (EK)، ترومبین، پروتئاز ویروس اچ تنباکو (TEVp)، پروتئاز راینوویروس انسانی 3C (HRV3C)، پروتئاز پروتئین کوچک اصلاح کننده یوبیکوئیتین (SUMO)، ویروس خالدار ورید تنباکو نیاز دارد. TVMV) پروتئاز و کربوکسی پپتیداز A/B (CPA/CPB).
نوع
|
آنزیم
|
سایت شناخت
|
حذف برچسب اندوپروتئازها
|
انتروکیناز (EK)، انتروپپتیداز
|
DDDDK↓
|
ترومبین
|
LVPR↓GS
|
پروتئاز TEV
|
ENLYFQ↓G
|
پروتئاز HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
پروتئاز SUMO
|
ساختار سوم SUMO
|
پروتئاز TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
حذف برچسب اگزوپروتئازها
|
کربوکسی پپتیداز A (CPA)
|
اسیدهای آمینه C ترمینال، به جز Pro، Lys و Arg
|
کربوکسی پپتیداز B (CPB)
|
C ترمینال Lys و Arg
|
سایر پروتئازها
کاربرد
|
آنزیم
|
عملکرد
|
سایر پروتئازها
|
پروتئاز K
|
یک پروتئاز سرین که پروتئین ها را با هیدرولیز پیوندهای پپتیدی هضم می کند.
|
IdeS، پروتئاز IgG
|
آنزیم های تجزیه کننده IgG (Ides) که در محل خاصی از ایمونوگلوبولین G (IgG) شکسته می شوند و قطعات Fab و Fc را تولید می کنند.
|
پروتئاز IgA1
|
یک آنزیم پروتئولیتیک که محل خاصی را در توالی ناحیه لولا ایمونوگلوبولین انسانی A1 (IgA1) می شکافد.
|
هسته ای
کاربرد
|
آنزیم
|
عملکرد
|
هسته ای
|
هسته ای
|
اسیدهای نوکلئیک (DNA یا RNA) را با هیدرولیز پیوندهای فسفودی استر می شکند.
|
محدود کردن آنزیم
|
اندونوکلئازی که DNA را در محل های خاص یا نزدیک آن می شکافد.
|
آمیداز
کاربرد
|
آنزیم
|
عملکرد
|
آمیداز
|
PNGase F
|
بین درونیترین بقایای GlcNAc و آسپاراژین مانوز بالا، هیبرید و الیگوساکاریدهای پیچیده شکاف میدهد.
|
Yaohai Bio-Pharma راه حل CDMO یک مرحله ای را برای معرف آنزیمی ارائه می دهد