Протеази для видалення тегу
Щоб покращити розчинність та спростити процес очищення рекомбінальних білків, дослідники зазвичай додають фузионні теги, серед яких найпоширенішими є His-tag, мальтозо-зв'язувальний білок (MBP) та глютатіон-S-переносчик (GST).
Хоча тег додається як додатковий рядок білка, його потрібно видалити, щоб зберегти біологічну активність у фармацевтичній промисловості. Видалення фузионних тегів вимагає протеаз з місцевою специфікою, таких як ентерокіназа (EK), тромбін, протеаза тютюнового етч-віруса (TEVp), людська риновірусна протеаза 3C (HRV3C), маленька убіквітиноподібна модифікаційна протеїна (SUMO) протеаза, протеаза тютюнового вірусного плямистого хвороби (TVMV) і карбоксипептида А/В (CPA/CPB).
Тип
|
Ензим
|
Сайт розпізнавання
|
Протеази для видалення тегів
|
Ентерокіназа (EK), ентеропептидаза
|
DDDDK↓
|
Тромбін
|
LVPR↓GS
|
TEV протеаза
|
ENLYFQ↓G
|
Протеаза HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
Протеаза SUMO
|
Третична структура SUMO
|
Протеаза TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
Екзопротеази для видалення тегів
|
Карбоксипептидаза A (CPA)
|
К-термінальні амінокислоти, крім Pro, Lys і Arg
|
Карбоксипептидаза B (CPB)
|
C-термінальний Lys і Arg
|
Інші протеази
Застосування
|
Ензим
|
Функція
|
Інші протеази
|
Протеаза K
|
Серинова протеаза, яка переварює білки шляхом гідроліза пептидних зв'язків.
|
IdeS, IgG протеаза
|
Ензими, що розкладають IgG (Ides), які відтвоюють у специфічному місці імуноглобулін G (IgG), формуючи фрагменти Fab і Fc
|
IgA1 протеаза
|
Протеолітичний ензим, який розщепляє певну місця у послідовності гіршового регіону імуноглобуліна A1 (IgA1).
|
Нуклеаза
Застосування
|
Ензим
|
Функція
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Розщепляє нуклеїнові кислоти (ДНК або РНК) шляхом гідроліза фосфодіестерових зв'язків.
|
Обмежувальний ензим
|
Ендонуклеаза, яка розщепляє ДНК у або поблизу певних місць.
|
Амідаза
Застосування
|
Ензим
|
Функція
|
Амідаза
|
PNGase F
|
Розщепляє між найбільш внутрішньою GlcNAc та аспарагіновими залишками високоманозних, гібридних та складних олігосахаридів.
|
Yaohai Bio-Pharma Пропонує Комплексне Рішення CDMO для Ензимних Реагентів